紫外-可见分光光度法在食品分析中的应用doc.docxVIP

紫外-可见分光光度法在食品分析中的应用紫外可见分光光度计既是一种历史悠久、传统的分析仪器,又是一种现代化的集光、机、电、计算机为一体的高技术产品,它的应用非常广泛,在有机化学、生物化学、药品分析、食品检验、医疗卫生、环境保护、生命科学等各个领域和科研生产工作中都已得到了极其广泛的应用,特别是在生命科学突飞猛进的今天,紫外可见分光光度计又是生命科学的眼睛,它已被国内外许多专家学者认定为生命科学仪器中的主干产品之一,可以预言,紫外可见分光光度计将有巨大的市场潜力和经济效益,它将为人类的生活、生存、发展和生态平衡提供有力的保障。下面就紫外分光光度法在食品分析方面的应用作一个简单介绍。1　紫外-可见分光光度法在食品分析中的应用1·1　酸奶中维生素A的测定酸奶是一种发酵奶制品,由于其丰富的营养成分以及独特的风味、口感而深受人们的喜爱。酸奶中含有一定量的维生素A,作为人体必需的营养元素,分析测定维生素A的含量具有重要的意义。目前分析维生素A的方法很多,有荧光分光光度法、气相色谱法、高压液相色谱法、可见分光光度法。其中比较常用的是采用三氯化锑作为显色剂的分光光度法,但这种方法有几个缺点。首先,生成的蓝色化合物不稳定,很快褪色,比色测定必须在6 s内完成;其次,三氯化锑具有强腐蚀性及毒性;此外,很易吸水,受温度、湿度的影响大,器皿装过试剂后难于洗涤等。王明华[1]等采用紫外分光光度法分析测定酸奶中维生素A的含量,样品经过皂化、提取、除溶剂等步骤后,于328 nm处测定其吸光度,测得维生素A的回收率为103·3%,平均值的标准偏差为0·32,变异系数为0·01;同时进行了维生素D对维生素A测定的干扰实验,实验结果表明,维生素D的存在不影响维生素A的测定结果。该方法与三氯化锑比色法相比,操作简便、安全。1·2　番茄红素的测定番茄红素是一种具有多种生理功能的类胡萝卜素,通常状况下与其它类胡萝卜素同时存在于多种生物体中。在实际研究中,番茄红素的准确测定始终是困扰研究人员的一个难题。目前的测定方法主要有: (1)以苏丹红代替番茄红素作为标准品,绘制标准曲线,用以测定番茄红素的含量; (2)以石油醚或正己烷为溶剂,在472 nm比色测定其吸收光度,用摩尔消光系数(E1·0%1 cm=3450)来计算其中番茄红素的含量; (3)依高压液相色谱法,通过与标准样品的峰面积比来测定样品中番茄红素的含量。现有这几种测定番茄红素的方法普遍存在着一定的缺陷：(a)不需要标准品,但其系统误差较大,同时又不能排除β-胡萝卜素等其它类胡萝卜素的干扰;(b)要求有番茄红素的标准样品,而高纯度的番茄红素本身稳定性很差,不宜长期存放,且价格非常昂贵,日常测定难度很大。而HPLC测定又要受到仪器设备及标准样品的限制。张连富[2]等从番茄红素及β-胡萝卜素(影响番茄红素测定的含量最多的类胡萝卜素)的紫外吸收光谱的差异入手,确定了以含2%二氯甲烷为溶剂、以502 nm吸收峰为检测波长的番茄红素测定方法,避免了其它类胡萝卜素的干扰,并将其转化为用消光系数来计算的形式,避免了番茄红素标准样品的制约。溶液中番茄红素的浓度在0·0017~3·12μg/ml范围内时,该检测方法的可信度在90%以上。1·3　水果汁中果糖的测定果糖的测定法有高效液相色谱法、离子选择电极法、傅里叶变换近红外光谱法和分光光度法等,前三种方法的操作都较复杂,而分光光度法报道的方法中均加入显色剂,如间苯二酚,铁氰化钾等,这些物质对环境有污染。占达东[3]通过研究发现:果糖在盐酸的作用下可生成羟甲基糠醛,通过对果糖在盐酸介质中的吸收光谱进行扫描,发现在波长291 nm处有最大吸收;果糖浓度在0~30μg/ml范围内服从比尔定律。利用该研究用紫外分光光度法测定了苹果鲜汁、鸭梨鲜汁和橘子鲜汁中的果糖含量。通过研究发现该方法具有很好的选择性和较高的灵敏度,适用于组成较复杂的分析对象中的果糖含量测定。该方法具有简便、快速、灵敏,对环境不造成污染,样品无需预处理等特点。1·4　大豆总异黄酮含量的测定大豆异黄酮是一类从大豆中分离提取的主要活性成分,具有异黄酮类化合物的典型结构。目前发现的大豆异黄酮共有12种,分为游离型的苷元和结合型的糖苷两类,主要活性成分为两种含量较高的苷元成分:金雀异黄素和大豆素。生物活性研究表明,大豆异黄酮特别是其中的金雀异黄素和大豆素,具有抗氧化、抗肿瘤、改善心血管功能、抗骨质疏松等功效。近年来,大豆异黄酮的生理活性已越来越引起社会和研究界的普遍重视,以大豆异黄酮作为食品添加剂的食品和制品在日本比较普遍,有些已走向欧美市场。国内关于大豆异黄酮的研究近些年来逐渐增多,出现了一些以大豆异黄酮为食品添加剂的食品及保健食品、保健药品。国外文献关于大豆异黄酮的含量测定多采用HPLC法或气相色谱-质谱(GC-MS)联用方法。