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动物实验的设计与实施
动物实验设计与实施
南方医科大学实验动物中心
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第一部分:动物实验设计和实施的基本过程
一、选择研究题目
1、广义的选择
2、狭义的选择
3、政府法规需要
正确选题应遵守的几个基本原则;
1、科学性:是指选题应建立在前人的科学理论和实验基础上,而不是毫无根据的胡思乱想。
2、目的性:指选题应具有明确的理论意义和实践意义,要能解决具体问题。
3、创造性:指选题应具有自己独到之处,或提出新规律、新见解、新技术、新方法,或是对旧有的规律、技术、方法有所修改、补充。
4、可行性:是指选题应切合研究者的学术水平、技术水平和实验条件,还要结合研究者的工作基础,使实验能够顺利实施。
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二、提出假说
假说提出的一般过程:
1、观察和记录所有相关的信息(包括研究者已开展的初步实验结果)
2、分析和归类这些信息
3、在这些信息的基础上提出假说
假说是预先假定的答案或解释,亦既是实验的预期结果。对于动物实验研究来说,假说是十分必要的。假说是实验研究设计的前提,如果没有假说,实验和观察就失去目标。假说关系着实验研究的目的性、计划性和预见性。
对假说既应努力加以验证,又应适时加以抛弃,重新建立新的假说,再加以验证。这样才有可能使正确的假说上升为结论、原理和学说。
研究者开展动物实验前,应在熟悉有关实验动物理论知识和动物实验技能的基础上,积极进行逻辑思维,结合实际条件,提出创新性课题和大胆的假说。
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三、选择研究材料
主要是用于制作实验需要的动物模型
常规品种(系)
特殊品种(系):疾病模型动物、转基因品系等
高峰期
特殊规格:F1、乳鼠等
外购:外地、外国、非商业性单位等
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四、准备研究方案
1、示意性的实验设计,包含了实验过程中的各种处理
2、对实验操作过程的解说和测量方法的描述
3、简述可能对动物造成的不适
4、应用动物的例数和所用的统计学方法都应当加以说明
5、简述实验准备情况,包括准备的方法、过程和分析的资料
6、实验中的一些实际情况:人员需求、实验负责人姓名、所需经费
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实验方法的选定
实验方法按学科可分为生理学方法、生物化学方法、生物物理方法、免疫学方法等;
按性质可分为形态学方法、机能学方法
按范围可分为整体综合方法和局部分析方法
按水平分:整体水平、器官水平、细胞水平、亚细胞水平、分子水平和量子水平等。
无论选用何种实验方法,均应保证以下几点:
可靠性:即切实可行,稳定可靠,是大家公认的方法,也即是经典方法。
优越性:指实验方法既具先进的一面,又便于与其它实验方法相互配合,故也称先进性和协同性。
创造性:即实验方法的创新和改良。
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例:外源基因转染的细胞体内移植研究测定方法:
整体水平:测定体液的生理生化指标
细胞和亚细胞水平:光镜和电镜观察
RNA水平:
原位杂交法测定mRNA
RT-PCR法半定量测定RNA表达量
Northern法定量测定。
蛋白水平:
免疫组化与生物体视学结合
Western blotting定量测定
Elisa法测蛋白活性
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