医学分子生物学(Medical Molecular Biology)教学.ppt

胞嘧啶核苷酸脱氨转变为尿 嘧啶核苷酸 + NH3 + H2O 亚硝酸盐 2、改变DNA的化学结构 （1）亚硝酸盐诱发突变 O N N R NH2 O NH N R O CH3 CH3 5-甲基胞嘧啶核苷酸脱氨转变为胸腺嘧啶核苷酸 + NH3 + H2O 亚硝酸盐 O N N R NH2 O NH N R O 腺嘌呤核苷酸脱氨转变为次 黄嘌呤核苷酸 NH2 N N R N N OH 亚硝酸盐 + NH3 + H2O N N R N N OH 鸟嘌呤核苷酸脱氨转变为黄 嘌呤核苷酸 H2N N N R N N OH 亚硝酸盐 + NH3 + H2O N N R N N HO （2）烷化剂诱发突变 OH H2N N N R N N OH H2N N N R N N 烷化剂 烷基 R 7-烷基G 3、结合到DNA分子上诱发突变 吖啶类（原黄素、吖黄素、吖黄）染色剂诱发突变 吖啶类物可嵌入DNA分子两条链配对的碱基之间 染色体不 等交换 插入或缺 失突变 4、紫外线及其它射线引起的DNA分子变化 （1）紫外线对DNA的作用 嘧啶二聚体的形成 T T T T T T 紫外线 光复活酶 (可见光) O O CH3 R R 紫外线 光复活酶 NH N O O CH3 NH N O O CH3 NH N O O CH3 NH N R R 嘧啶二聚体的形成 胞嘧啶脱氨作用 O N N R + NH3 紫外线 + H2O NH2 O NH N R O （2）X、?、?、?等射线对DNA的作用 ①使DNA分子两条链的A-T、C-G之间氢键断裂； ②使DNA分子的碱基与糖基之间的糖苷键断裂； ③形成嘧啶二聚体。 三、基因突变的遗传效应及后果 （一）基因突变的遗传效应 1、遗传密码的改变 错义突变 无义突变 同义突变 移码突变 （1）错义突变（missense mutation) 在基因的编码序列中，由于碱基的替换，使编码某一氨基酸的密码子变为编码另一氨基酸的密码子，这种突变称为错义突变。 正常顺序 UAC-AGU-CCU-ACA-GAA-AAC-GCU 酪 丝 脯 苏 谷 天酰 丙 错义突变 UAC-AGU-CCU-ACA-GAA-AGC-GCU 酪 丝 脯 苏 谷 丝 丙 （2）无义突变（nonsense mutation) 在基因的编码序列中，由于碱基的替换，使某个氨基酸密码转变为终止密码，致使肽链合成提前终止，肽链缩短，这种突变称为无义突变。 正常顺序 UAC-GUC-CUA-CAG-AAG-ACG- 酪 缬 亮 谷酰 赖 苏 CUA-TAT 亮 酪 无义突变 UAC-GUC-CUA-CAG-UAG-ACG- 酪 缬 亮 谷酰 CUA-UAU 终止密码 （3）同义突变（synonymous mutation) 同义突变是指基因的编码序列中碱基替换不改变遗传密码含义，因此其表达产物多肽链的氨基酸排列顺序不发生变化。 正常顺序 UAC-AGU-CCU-ACA-GAA-AAC-GCU 酪 丝 脯 苏 谷 天酰 丙 同义突变 UAC-AGU-CCU-ACG-GAA-AAC-GCU 酪 丝 脯 苏 谷 天酰 丙 （4）移码突变（frame-shifting mutation): 在基因的编码序列中,插入或缺失一个或数个(非3的整倍数)碱基,均可造成突变位点后的遗传密码阅读框架发生改变,不能编码出原来多肽链的氨基酸排列顺序。这种突变称为移码突变。 DNA芯片技术流程图 芯片制作 样品的制备 显微光蚀刻 压电打印 分子打印 原位合成芯片 探针设计与制备 支持物预处理 探针打印 探针固化 DNA微集阵列 样品核酸的 提取与纯化 扩增与标记 标记样品 的纯化 杂交及杂交后清洗 扫描与分析 一、芯片的制备 （一）生物芯片支持物的预处理 1、实性材料支持物的预处理 硅片、玻璃片、瓷片、聚丙烯酰胺凝