第11章,色谱分析法,修改详解.pptVIP

色谱分析法;一.色谱法的发现 ;;样品混合物中各组分性质和结构的差异，与固定相发生作用的大小也有差异;三. 色谱法的分类 ;;2. 液相色谱法;四. 色谱分析仪器基本流程;液相色谱仪;流动相携带进样装置引入的混合试样进入色谱柱 混合试样在色谱柱中进行分离 各组分依次进入检测器检测 检测响应信号导入计算机 得到色谱图 根据色谱图参数进行定性定量分析;五. 色谱法的特点 :; 关于色谱峰 关于保留值 关于峰宽度 关于色谱曲线的意义;1. 关于色谱峰的术语;(1) 色谱流出曲线 ;; （2）用体积表示的保留值;（3）相对保留值 r21;3. 关于色谱峰区域宽度的术语;;;分离度R;理论上证明: 对于峰形对称的色谱峰; 要改善物质对的分离（提高R），即提高两相邻物质的分离度，增大r21 是最有效的手段。 ;三、色谱定性定量方法;应用范围：适用于简单混合物，对该样品已有了解并具有纯物质的情况。 优点：应用简便，不需要其他仪器。 缺点：定性结果的可信度不高。 提高可信度的方法：双柱、双体系定性;(2) 与其他方法结合定性;2. 定量分析的方法 ;A）各种峰面积的测量方法;B）定量校正因子的测量与计算;C）计算组分含量的几种方法;适用条件：;适用条件 ：;一、气相色谱仪的流程;1.载气系统 : ;二. 分离原理;;2. 分配系数 K ：;总结 :;三. 气相色谱固定相及其选择;2. 气-液色谱——担体+固定液;固定液：;固定液类型;以非极性角鲨烷的P=0 强极性??ˋ一氧二丙腈P=100;(4) 固定液的选择;;热丝;;(3) 检测原理 基于不同的物质具有不同的热导系数 (4) 操作条件的选择 ;;;(3) 原理 蒸气分子受激发后被离子化，在电场作用下定向运动形成离子流，然后进行放大和记录。 (4) 操作条件的选择 气体流量 载气:氢气:空气=1:1:10 气体纯度：要求高 使用温度：大于80℃;1. 载气的选择;2. 柱温的选择;tc=45℃;一般比柱温高30~70℃;;2. 与填充柱气相色谱系统的区别;一、概述;2. 高效液相色谱法的特点;二. 高效液相色谱仪;1. 高压输液系统;2．进样系统 ;3. 分离系统——色谱柱 ;4．检测系统 ; 表. 液相色谱常用检测器的一般性质 ;1. 紫外检测器;固定波长的紫外检测器 可变波长的紫外检测器 二极管阵列检测器;(A) 固定波长的紫外检测器; (B) 可变波长的紫外检测器;(C) 光电二极管阵列检测器;2. 差示折光检测器;;示差折光检测器;;;三. HPLC主要分离类型及其原理 ;;;(2) 反相键合相色谱法： 固定相：非极性键合相，如C8柱，C18柱流动相：极性溶剂，甲醇-水、乙腈-水等 适用范围：分离非极性、极性和离子性化合物 分离选择性：极性强的组分先洗脱出柱。;(3) 固定相 ;;(4) 流动相;流动相的强度和选择性 溶剂的极性（强度） 正相色谱：溶剂极性越强，洗脱能力越强 反相色谱：极性弱的溶剂洗脱能力强 溶剂的选择性 不同种类的溶剂，分子间的作用力不同，故选择性不同 混合溶剂（二元或多元流动相）;溶剂的种类 正相：正己烷、正庚烷、乙醚、二氯甲烷、氯仿等，己烷为主体，加入质子接受体乙醚或甲基叔丁基醚，质子给予体氯仿，偶极溶剂二氯甲烷 反相：水、甲醇、乙腈、四氢呋喃、乙醇及其混合物等，以水为主体，加入质子接受体甲醇，质子给予体乙腈，偶剂溶剂四氢呋喃。;;2. 液固色谱法; ; 硅胶为固定相时：以弱极性的正构烷烃为主体，加入二氯甲烷等中等极性溶剂调节合适的洗脱强度。 可用水对硅胶进行减活处理，或加入四氢呋喃、乙腈、甲醇、异丙醇等改性剂;(4) 应用;3. 离子交换色谱法和离子色谱法 ;（2）固定相 离子交换树脂，根据功能基分为 强酸型（磺酸基团） 强碱型（季铵基） 弱酸型（羧酸） 弱碱型（伯、仲、叔胺）;（3）流动相 双柱抑制型：分离阳离子，一般采用无机酸如HCl，HNO3等；分离阴离子，一般采用NaOH、NaHCO3/NaCO3。 单柱非抑制型：分离阳离子，用低浓度的HCl，HNO3等；分离阴离子，可用苯甲酸及其盐、酒石酸、柠檬酸等 ;? （4）应用;4. 体积排阻色谱法（SEC） ;分离原理示意图;;（3）固定相;? （4）流动相;（5）应用