生物发酵培养技术指导.ppt

生物制药工艺学 发酵工程制药 第一节：微生物细胞工程（发酵工程制药）生产原理 第二节：利用微生物进行药物的生产实例 第一节：微生物工程（发酵工程制药）生产原理 人工培养的微生物，通过体内的特定酶系，经过复杂的生物化学反应过程和代谢作用，最终合成人们所需要的药物如抗生素、氨基酸、有机物、维生素。这种方法称为微生物细胞工程。 一：最常用的工业微生物 二：微生物的培养技术 三：细胞浓度的测量 四：微生物发酵的工艺学原理 五：工业微生物菌种的制备和改良 六：发酵生产过程 七：灭菌技术 八：分离纯化技术 九：干燥技术 讲解分章节内容 一：最常用的工业微生物 1：细菌 2：放线菌 3：霉菌 4：酵母 青霉菌 1：细菌 （1）醋杆菌属--------醋化醋杆菌（Acetobacter aceti）可以将酒精转变为醋酸。弱氧化醋杆菌（Acetobacter suboxydans）可以将山梨糖醇转变为山梨糖。 （2）乳杆菌属--------德氏乳杆菌（Lactobacillus delbriiekii）可以将糖转变为乳糖。 （3）链球菌属（Streptococcus）-------用来生产乳酸。 （4）片球菌属（Pediococcus）-------用来生产乳酸。 （5）串珠菌属（Leuconostoc）-------用来生产乳酸。 （6）芽孢杆菌属-------枯草杆菌（Bacillus subtilis）可以用来生产α-淀粉酶、肌苷、鸟苷等核苷。 （7）梭菌属------丙酮丁醇梭菌（Clostridium acetobutylium）用来生产丙酮、丁醇。 （8）大肠杆菌（Escherichia coli）用来作为基因工程的克隆菌。 2：放线菌 有以下分类 红霉素链霉菌（S.enytnreus） 能产生红霉素。 卡那霉素链霉菌（S.kanamycetieus） 能产生卡那霉素 金霉素链霉菌（S. aureofaciens） 能产生金霉素。 委内瑞拉链霉菌（S.veneznelae） 能产生氯霉素 3：霉菌 （1）曲霉属-------米曲霉（Aspergillus oryzae）能产生高峰淀粉酶。 （2）黑霉属（A.niger）------能产生酸性蛋白酶、蛋白酶。 （3）青霉属--------点青霉（Penicillium.notatum）、产黄青霉（P.chrysogenum）能产生青霉素。橘青霉（P.citrinum）可产生核酸酶P1。 4：酵母 酵母属-------最常用的是酿酒酵母，用于进行酒精发酵。 二：微生物的培养技术 （一）培养基组成 （二）培养基的分类 （三）培养方法 （四）培养条件 （一）培养基组成 1、碳源 一般为蔗糖、葡萄糖。 工业用碳源为淀粉水解液、 糖蜜、干薯粉、甲醇、乙醇、 石油、醋酸等等材料。 2、氮源 主要有硫酸铵、 尿素、豆饼水解液。 3、无机盐 磷酸二氢钾、 磷酸氢二钾 七水硫酸镁。 4、微量生长因子 生物素 硫铵素 玉米浆最常用 （二）培养基的分类 1、细菌用培养基 以肉汤+蛋白胨+酵母膏作为其组成物质。 2、酵母、霉菌用培养基--------以曲汁和麦芽汁为最常用 将米曲（或者麦芽汁）添加适量水，在55℃下糖化2小时， 经过过滤，滤液稀释至糖度10度，备用。 3、培养霉菌则专用蔡氏霉菌培养剂 蔗糖20-30g、硝酸钠3g、磷酸二氢钾1g、氯化钾0.5g、 七水硫酸镁0.5g、硫酸亚铁0.01g、蒸馏水1L。 4、工业用培养基---------定量组成培养基配方 （三）培养方法 按培养基类型分为----------固体培养法、液体培养法。 按操作方式分为---------分批培养、半连续培养、连续培养。 按氧气供应分为--------需氧培养、厌氧培养。 下面分别介绍其中重要的5种方法： 1、浅盘培养 该方法选用于固体培养法、也适用于液体培养法。 其方法是将固体或者液体培养基盛于不锈钢制的浅盘内，接种菌种，在保温室内培养。 2、厚层通风培养 此方法用于固体培养。 这种方法的优点是培养量大，并且节省劳动力。国内酱油厂多采用此法。 所用设备是在水面建造大型水泥槽 水泥槽底部铺上多孔板 板上放置固体培养基 接种之后 将空气由多孔板下部通入培养基内 3、液体通风深层培养 简称深层培养法，是最先进的方法。 在我国，抗生素、柠檬酸的生产常常采用此法。 4、厌氧培养 （1）简单的方法是，用一般的发酵槽，撤去通风设备。（2）真正的方法是必须把氧气抽除，采用真空泵来抽去氧气。 较为先进的方法是 加拿大的BBL Gas Pak 150的厌氧培养器 采用由水发生氢气的方法 此氢气与氧气