环境生物学第三章分析.pptVIP

第三章 污染物的生物效应检测 本章将讨论以下内容： 生物测试及方式 一般毒性试验 生物的分子和细胞水平检测 生物致突变、致畸和致癌效应检测 微宇宙法 第一节 生物测试及方式 一、生物测试（Bioassay）的概念： 指系统地利用生物的反应测定一种或多种污染物或环境因素单独或联合存在时所导致的影响或危害。 注释1：所利用的生物反应包括分子、细胞、组织、器官、个体、种群、群落、生态系统各级水平上的反应 注释2：生物测试与物理化学测试的比较 二、生物测试的方式 根据生物测试所经历的时间长短： 短期生物测试/中期生物测试/长期生物测试 根据试验溶液或试验气体的给予方式： 静止式生物测试/流动式生物测试 根据生物测试中所用测试生物的物种： 单物种生物测试、多物种生物测试和模拟生态系统生物测试 根据生物测试中所测试的生物效应性质： 毒性试验、积累试验、行为试验、“三致”（致癌、致畸、致突变）试验、损伤试验等等。 。。。。。。 受试生物的选择 敏感性 广泛性和可获得性 有代表性，是生态系统的重要组成 易于实验室培养和繁殖 具有丰富的生物背景资料 对毒物的响应能够被反应和测定 等等 第二节 一般毒性试验 一、生物毒性的基本概念 毒物（Toxicant） 一定条件下，可引起不良生物反应的外来化学物质。 毒物与非毒物之间不存在绝对的界限，通常一种物质只有达到中毒剂量时才是毒物。 中毒（Intoxication） 生物体受到毒物作用引起功能或器质性改变后出现的疾病状态。 中毒是各种毒性作用的综合表现，包括急性中毒、亚急性中毒、慢性中毒。 效应（Effect） 也称为作用，指接触一定剂量化学物后，使机体产生的生物学改变。 效应是对个体而言的，这种改变可用一定的计量单位表示。 反应（Response） 指接触一定剂量化学物后，产生某种效应并达到一定强度的个体在群体中所占的比例。 反应是对群体而言的，用百分率或比值来表示，如发病率、死亡率等。 危害性（Hazard）: 有毒物质在与机体接触或使用过程中，引起中毒的可能性。 与风险（Risk）相近 危险性： 化学物质在正常的生产使用条件下，能引起机体发生中毒的可能性。 偏重物质本身性质。 二、毒性试验常用参数 致死剂量或致死浓度（Lethal Dose/LD， Lethal Concentration/LC） 表示一次染毒后，在一定时间内引起受试动物死亡的剂量或浓度。 绝对致死剂量或浓度（LD100、LC100） 半数致死剂量或浓度（LD50、LC50） 最小致死剂量或浓度（MLD、MLC） 最大耐受剂量或浓度（LD0、LC0 ） 最大无作用剂量（Maximum No-Effect Level, MNEL） 指化学物在一定时间内，按一定方式与机体接触，按一定的检测方法或观察指标，不能观察到任何损害作用的最高剂量。 随实验方法的改进而变化 每日容许摄入量（Acceptable Daily Intake，ADI） 最高容许浓度（Maximum Allowable Concentration，MAC） 最小有作用剂量（MEL）/中毒阈剂量（TL） 半效应浓度（EC50） 在一定时间内，引起50%受试生物的某种效应变化的浓度。 只有同种效应才能比较。 半数抑制浓度（IC50） 是指能引起受试受试生物50%抑制的浓度 常用于对生长速率和活性的抑制。 三、急性毒性试验（Acute Toxicity Test） 急性毒性试验（Acute Toxicity Test） 研究化学物质大剂量一次染毒或24小时内多次染毒动物所引起的毒性的试验。 其目的是短期内了解该物质的毒性大小和特点，并为进一步开展其他毒性试验提供设计依据。 急性毒性试验类型 哺乳动物急性毒性试验 水生生物急性毒性试验 蚯蚓急性毒性试验 急性毒性试验过程（啮齿类） 1、按试验要求选择受试生物 常用成年大鼠或小鼠，雌雄动物同时试验，对试验动物预先观察几天后标记编号并随机分组。 2、预备试验和确定剂量组 选用少量动物进行预备试验，求出引起动物90％（或全部）死亡的剂量（即最高剂量组剂量）和引起动物10％死亡（或不死亡）的剂量（即最低剂量组剂量）。 在最高剂量组剂量和最低剂量组剂量的范围内，按等比级数插入若干个中间剂量（一般为4-6个），从而确定正式试验的剂量组。 3、染毒方式和受试物的配制 一般用灌胃法和人工熏气法。 受试物的配制：配制试验所需的最高剂量浓度溶液，然后依次稀释到所需浓度。 4、观察指标 中毒症状：一般观察24～48小时，最好观察到绝大多数动物出现典型中毒症状。 动物死亡数目和死亡时间 病理检查：对于试验时立即死亡的动物，可解剖，分析死亡原因，看是技术事故还是中毒引起的死亡。 目的是最终确定最大无作用剂量，为