苎麻果胶测定方法.docVIP

果胶的测定方法 引言 1.1 果胶简介 果胶是植物胶，是以半乳糖醛酸为主的复合多糖类物质，属多糖类，存在于高等植物的叶、根、茎的细胞壁内，与细胞彼此粘合在一起，尤其是果实和叶中的含量多。在橙属水果的果皮和苹果渣及甜菜渣中都有20%-50%的果胶。果胶是一种重要的多糖类物质，其用途很广，在食品、医药和其它工业中广泛应用。 果胶为粉末物质，黄色或白色；无臭，具粘稠感。能溶于20倍水中生成枯稠溶液，不溶于酒精及一般有机溶剂，以酒精、甘油或糖浆等浸润则极易溶于水中。在酸性条件下比较稳定，遇强酸强碱易分解，果胶溶液在室温与强碱作用生成果胶酸盐，这种盐已失去凝胶作用。各种果实中的果胶，通常以部分甲基化了的多缩半乳糖醛酸的钙或镁形式存在，经稀盐酸水解可以得到水溶性果胶，即多缩半乳糖醛酸甲酯。因此，可以确定果胶的基本组成是半乳糖醛酸，属酸性物质。为非曲直高分子聚合物，分子量20000-400000，水解时，产生果胶酸和甲醇等。 苎麻主要由纤维素、半纤维素、木质素和果胶等组成，除了纤维素外，其他物质统称为胶质。果胶在苎麻生长期是纤维素、半纤维素、和木质素等生长的营养物质，并起着调节植物体内水分的作用”1，其含量随着苎麻的生长而逐渐降低，但在植物生长末期又稍有回升。因此，通过测定果胶的含量，可以实时监测苎麻的生长情况。另外，为获得可纺纤维，必须对收割后的原麻进行脱胶处理，纤维脱胶程度直接影响到后序加工的技术指标；而果胶作为原麻胶质中的成分之一，也需进行成分分析。 1.2 果胶的测定方法研究进展 1.2.1 半乳糖醛酸测定法 果胶的制取步骤如下： 原料→粉碎→洗涤→消毒晾干→水解→粗果胶→脱皮→胶状果胶→粉碎→产品 一、提取操作 将精选的苎麻粉碎至2-3mm，用60℃的水冲洗两次，除去糖类等杂质，然后喷洒酒精晾24h。称取100g晾干后的物料置于3000ml烧瓶中，加1500ml水，并用HCl将其PH值调到2.2，加热到75℃，在此温度下水解20h，此时果胶原水解，并溶解在酸性溶液中，过滤，弃去残渣，滤液加有机溶剂，初次沉淀出果胶，用水洗涤，然后加水溶解粗果胶，加2g活性炭于70℃时脱色1h，热滤后，滤液于75℃时浓缩，浓缩到70ml的溶液时，加乙醇，再沉淀果胶，过滤，用稀乙醇洗涤，沉淀物质经低温真空干燥，得到胶状果胶，粉碎后即得果胶成品；滤液主要是稀乙醇，蒸馏后可重新使用。经以上操作制得的果胶产品及产量。 二、果胶含量的测量 称取以上所得的样品0.1g放入250ml的烧杯中，加入无水乙醇30ml，充分混合后，用表面皿盖好，于80-90℃加热20min，冷却一小时，抽滤，将沉淀反复用无水乙醇洗到无糖份为止。然后将沉淀移入250ml的锥形瓶中，并用60ml加热至沸的0.05ml/L的HCl将残留在器皿上的沉淀物完全转移到瓶中：在沸水浴中回流一小时，冷却到室温转入100ml的容量瓶中，用水稀释到刻度，再取该液5ml稀释到20倍后，取2ml溶液按半乳糖醛酸的工作曲线法测定样品的吸光度为0.320，由工作曲线查得这时的浓度为41.76ug/ml。 代入公式： 果胶含量=半乳糖醛酸浓度/(样品重量*500)*100% 从而得到果胶含量。 1.2.2 微波辅助萃取测定法 微波辅助萃取技术是利用微波对细胞的破壁作用和加热作用，加速细胞内的有效成分的快速溶出。微波萃取在天然产物的萃取方面已有广泛的应用，利用微波辅助萃取技术，从橘皮、柠檬皮、西番莲果皮中提取制备果胶也多有研究13-51，但将其应用到天然产物成分分析中则少有报道。本文利用微波辅助萃取技术对苎麻中的果胶进行了快速萃取，并对其工艺条件进行了优化，按照GB5889---86中的计算方法计算果胶的含量；另参照果胶的制备方法将萃取液中的果胶制备成果胶粉，采用红外光谱法对微波萃取所得果胶粉进行了鉴定。 一、材料与方法 ○实验试剂和仪器 试剂：草酸铵、浓硫酸、苯、95％乙醇、盐酸、溴化钾。以上试剂均为市售分析纯。 标准果胶粉：sigma P9135 样品：湖北省南漳县所产苎麻。 仪器：N9G99S型微波炉、BP221S型分析天平(O．0001g)、pHS一3C型数字酸度计、TENSOR 37型红外光谱仪。 ○苎麻预处理 将苎麻剪碎成一定长度，烘干称取5g左右的苎麻，放人盛有一定量蒸馏水的烧杯中，再置于450W微波炉中加热3min，冷却后重新换新蒸馏水重复加热6min，除去水溶性的糖及部分色素类物质等，过滤将苎麻烘干至恒重并称重备用。 ○试验方法 选取盐酸为萃取剂，采用微波辅助萃取，选择不同的浸泡时间、浓度、苎麻粒径、液料比、微波辐射功率、微波时问、萃取剂和萃取次数等进行条件优化，将萃取果胶后的苎麻进行洗涤、烘干、称重，根据“GB5889---86苎麻化学成分定量分析”中的计算方法得果胶含量，同时选用GB