13紫外可见吸收光谱汇编.ppt

狭缝变宽 苯蒸气 精细结构消失 狭缝变宽 氯化镨溶液 峰高降低 峰变宽 狭缝过窄时，信噪比低 需选择最佳狭缝宽度 狭缝宽度变宽时，峰变宽，峰高降低峰面积不变 3. 分光光度法的误差 0.5%~2% 仪器的随机误差对浓度测量精度的误差影响 分3种情况： A：常见于普通光谱仪应选择吸光度在0.2~0.8 B：常见于高质量光谱仪A0.02时不准确 C：常见于高质量双光束光谱仪，因为吸收池位置不能精确重复 4. 定量分析示例 多组分定量分析 基于比尔定律的加和性 平衡常数的测定 酸碱离解常数的测定 * * * * 前提： （1）入射光是单色光 （2）吸收发生在均匀的介质中 （3）吸收过程中，吸收物质互相不发生作用 1) 吸收物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数,不随浓度c 和光程长度b的改变而改变。在温度和波长等条件一定时， 仅与吸收物质本身的性质有关。 2) 可作为定性鉴定的参数 3) 可用来估量定量分析方法的灵敏度。ε max越大，定量分析的灵敏度越高。 吸光系数→吸收强弱： ε104～105 → 强吸收 102～104 → 中强吸收 ﹤102 → 弱吸收 摩尔吸光系数 比尔定律加和性原理 标准曲线法测定未知溶液的浓度时，发现：标准曲线常发生弯曲（尤其当溶液浓度较高时），这种现象称为对朗伯—比耳定律的偏离。 偏离比尔定律 指数曲线 过零点的直线 实际上 吸光度对溶液浓度直线有时是非线性的 理论上 偏离比耳定律的原因 (1) 比尔定律自身的局限性 分子间相互作用 折射率变化 反射和散射的影响 浓度0.01 M时基本不考虑 用空白溶液做相对校正 浓度0.01 M时基本不考虑 反射和散射对紫外吸收光谱测量的影响 8.5% 损失 （2） 化学性因素 当溶液浓度c 0.01 mol/L 时，吸光粒子间可能发生离解、聚合、互变异构、配合物的形成等相互作用，直接影响了吸光度。 酸碱反应 HB有吸收，B无吸收 分布系数 与pH有关 溶液pH 对测定有重要影响 配位反应 配离子浓度变化，偏离比尔定律 若加入氯离子，平衡右移 溶液中存在2种吸光物质 非缓冲体系中浓度的影响 溶液中存在2种吸光物质 pH的影响 以酸碱指示剂甲基红为例，两种吸光物质的比例与pH有关 红 黄 等吸光点 等吸光点处吸光度与pH无关 两种吸光物质具有相同的摩尔吸光系数 在等吸光点处分析可以避免偏离比尔定律 （3）物理性因素 比耳定律的前提条件之一是入射光为单色光。 难以获得真正的纯单色光。分光光度计只能获得近乎单色的狭窄光带。复合光可导致对比耳定律的正或负偏离。 非单色光、杂散光、非平行入射光都会引起对朗伯—比耳定律的偏离，最主要的是非单色光作为入射光引起的偏离。 非单色光对吸收的影响 差别越大，偏离越大 如何减少非单色光的影响？ 为克服非单色光引起的偏离 选择比较好的单色器。 将入射波长选定在待测物质的最大吸收波长且吸收曲线较平坦处。 吸收池不匹配 光学性质不同 光程不同 导致偏移比尔定律 解决策略： 使用同一套比色皿 利用线性回归对工作曲线的斜率和截距进行计算 利用同一个比色皿通过单光束仪器测量空白和样品 三、紫外-可见分光光度计 （一）基本部件 吸收池 0.575 光源 单色器 检测器 显示 （1）光源： 用于提供足够强度和稳定的连续光谱。分光光度计中常用的光源有热辐射光源和气体放电光源两类。 热辐射光源用于可见光区，如钨丝灯和卤钨灯；气体放电光源用于紫外光区，如氢灯和氘灯，在180 ~ 375 nm范围内产生连续光谱。钨灯和碘钨灯可使用的范围在340 ~ 2500 nm。 氙灯 氢灯 钨灯 紫外光源---氘灯 可见光源---钨灯 （2）吸收池：用于盛放溶液并提供一定吸光厚度的器皿。它由透明的光学玻璃或石英材料组成。玻璃吸收池只能用于可见光区，而石英吸收池在紫外和可见光区都可使用。最常用的吸收池吸光厚度为1cm。 （3）检测器：检测器的作用是检测光信号。常用的检测器有光电管和光电倍增管。 （4）信号显示器：常用的显示器有检流计、微安表、电位计、数字电压表、记录仪、示波器及数据处理机等。很多型号的分光光度计装配有微处理机，一方面可对分光光度计进行操作控制，另一方面可进行数据处理。 （二）紫外-可见分光光度计类型 1 单波长分光光度计 1) 单光束分光光度计 缺点 测量结果易受光源波动性的影响，误差较大 基于LED的光度计 波长：420 450 476 500 550 580 600 650 nm 带宽： 15 nm 单光束分光光度计 2) 双光束分光光度计 可自动扫描吸收光谱；