第五節、提取分离.pptVIP

第五节、提取分离 （一）提取 1.酸水提取法 2.醇类溶剂提取法 3.与水不相混溶的有机溶剂提取法 1.酸水提取法 （1）离子交换树脂法：酸水提取液通过离子交换树脂 （2）沉淀法 ①酸提碱沉法 ②盐析法：适用中等弱碱。 黄藤1%H2SO4水溶液 H2O 沉淀 碱化至pH=9；加NaCl达饱和 掌叶防已碱 ③雷氏铵盐沉淀法 季铵碱的水溶液 水溶液 沉淀(雷氏复盐) 雷氏铵盐沉淀 沉 淀 滤 液 滤液 (B2SO4) 硫酸钡沉淀 季铵碱的盐酸盐 加酸水调至弱酸性 加新配制的雷氏铵盐饱和/H2O 溶丙酮（乙醇）中 加Ag2SO4饱和水溶液 加入氯化钡（BaCl2） 2.醇类溶剂提取法 生 药 H+ / H2O 药 渣 醇 液 OH-/H2O 醇或酸性醇 挥醇；加酸水 碱性较弱的碱 亲水性Alk CHCl3 沉 淀 Alk OH-/H2O CHCl3 3.与水不相混溶的有机溶剂提取法 生 药 残 渣 CHCl3 CHCl3 H+/H2O 碱化（如NH4OH）（使Alk游离） 渗滤（或浸渍）（如CHCl3等） H+/H2O OH-/H2O Alk沉淀 亲水性Alk 碱性较弱的Alk （二）分离 溶解性——重结晶法 碱性强弱——pH梯度萃取 色谱法 （二）分离 生物碱的分离 系统分离 特定分离 多用于基础研究 侧重于生产实用 总 碱 单体Alk的分离 类别 指酸碱性强弱 部位 指极性不同 依据Alk的理化性质 (1)利用生物碱及其盐类的溶解度不同进行分离 (2)利用生物碱碱性强弱不同进行分离 PH梯度分离法 ①混合物溶于稀酸水，逐渐调碱性，分别用CHCl3萃取 PH由低到高，生物碱碱性由弱到强 ②混合物溶于CHCl3中，用缓冲液依次萃取 PH由高到低，生物碱碱性由强到弱 (3)利用生物碱的特殊功能团性质进行分离： (5)色谱法 常用氧化铝作吸附剂 硅胶柱：展开剂中一般加少量二乙胺等碱性试剂； 大孔树脂 Sephdex-LH20 各种加压柱：低压柱、中压柱、制备性HPLC等； 提取分离实例——长春碱与长春新碱 长春花全草 (干粉80目) 苯渗漉液 药 渣 苯 液 H+/H2O 苯渗漉 pH=4 6%酒石酸水溶液萃取 过滤，氨水碱化至 pH=6~7 CHCl3提 除水杂 除脂杂 除碱性较强的成分 H2O CHCl3 弱碱 Alk硫酸盐 回收氯仿，蒸干 溶于无水乙醇 H2SO4调pH=3.8~4.1 Alk沉淀 溶于H2O，氨水碱化至 pH=8~9 CHCl3萃取 除脂杂 除水杂 精 制 H2O CHCl3 游离Alk 长春碱 醛基长春碱 回收氯仿 溶于苯:氯仿(1:2)液中 通过Al2O3吸附柱 用苯:氯仿(1:2)洗脱 色谱分离 （一）色谱法 1.薄层色谱法 2.纸色谱法 与对照品共薄层，与文献报道的数据进行对照。 测定理化常数（如：熔点），测定其衍生物的理化数据等来鉴定生物碱。 第六节 生物碱的结构鉴定与测定 （二）谱学法 紫外光谱、红外光谱、质谱、核磁共振 UV——反映分子中所含共轭系统情况； IR——利用特征吸收峰，鉴定结构中主要官能团； NMR——各种技术图谱测定结构； MS——依据文献，结合主要生物碱类型的质谱特征进行解析。 一、光谱法在生物碱的结构鉴定与测定中的应用 (一)紫外光谱 当生色团（羰基、双键、苯基和硝基等）在生物碱的整体结构中 时，UV可以反映其骨架类型特征，对其骨架类型的判断和推定有重要作用。如：吡啶、喹啉、氧化阿朴菲等。 若生色团仅是连接在生物碱的母核上或侧链上时，其UV对判断其母核类型的作用十分有限。不同类型的生物碱具有相同或相似的UV谱，不能由UV谱推断生物碱的骨架类型。如托品类、苄基四氢异喹啉类、二氢吲哚类等。 (二)红外光谱 1.酮基的吸收 有跨环效应时，酮基吸收在1660-1690cm-1 2.Bohlmann吸收带 在反式喹诺里西丁环中，凡氮原子邻碳上的氢有二个以上与氮孤电子对呈反式双直立关系者，且氮孤电子不参与共轭时，则在2800-2700cm-1区域有2个以上明显的吸收峰,而顺式异构体则此峰极弱。 (1)二个以上与氮孤电子对呈反式双直立氢 (2) 氮孤电子不参与共轭 注意点： (1)在氯仿溶液中测定时，多为二个峰；用KBr压片时，多为一簇峰； (2)含有喹诺里西丁环的生物碱结构类型：喹诺里西丁类、吐根碱类、吲哚碱类中的柯南