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- 2017-04-10 发布于上海
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實验技术六 放线菌的培 养与形态观察
实验技术六 放线菌的培 养与形态观察
一、实验目的
1. 学习并掌握用玻璃纸培养放线菌的方法;
2. 观察放线菌的培养特征;
3. 初步了解放线菌的个体形态特征。
二、基本原理
玻璃纸具有半透膜性,其透光性与载玻片基本相同。将灭菌的玻璃纸覆盖在琼脂平板表面,然后将放线菌接种于玻璃纸上,经培养使放线菌生长在玻璃纸上。观察时,将长菌的玻璃纸剪取小片,贴放在载玻片上,直接镜检。这种方法可观察到放线菌的自然生长状态,也便于观察不同生长期的形态。
三、实验器材
1. 菌种:405(球孢链霉菌)和 4029(紫色链霉菌);
2. 培养基:高氏Ⅰ号培养基;
3. 其他器材:无菌平皿、无菌玻璃纸、无菌盖玻片、无菌玻璃涂棒、1mL无菌吸管、盛有9mL无菌水试管若干支、无菌镊子、酒精灯、接种环、剪刀、载玻片、显微镜等。
四、实验步骤
1. 玻璃纸灭菌
将玻璃纸和滤纸剪成与培养皿大小相同的圆形纸片,用水浸泡后把湿滤纸和玻璃纸交互重叠地放在培养皿中,使滤纸和玻璃纸隔开,然后进行湿热灭菌,备用。
2. 制备琼脂玻璃纸平板培养物
(1)将高氏一号琼脂培养基熔化后倒平板,待凝固后,无菌操作用镊子将玻璃纸覆盖在琼脂平板上,展平。
(2)稀释菌液:将放线菌斜面菌种制成10-3的孢子悬液。
(3)接种:用1mL无菌吸管取0.2mL孢子悬液滴加在玻璃纸平板上,然后用无菌涂棒涂抹均匀。也可用接种环
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