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- 2017-04-11 发布于河北
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2015医学科研课题开题报告
2015医学科研课题开题报告
论文应符合专业培养目标和教学要求,以学生所学专业课的内容为主,不应脱离专业范围,要有一定的综合性,以下就是由编辑老师为您提供的医学科研课题开题报告。
研究方法:
第一部分:正常表皮组织、痣细胞及黑色素瘤细胞中T-cadherin表达情况
免疫组织化学和免疫细胞化学
1.材料:从正常人皮肤切取的痣组织,人黑色素瘤细胞株
2.主要试剂和溶液
(1)第一抗体:兔抗人T-cadherin 抗体
(2)第二抗体:生物素标记羊抗兔IgG
(3) “三抗” :链亲和霉素标记HRP
3.设备
4.方法
(1)冷冻切片的免疫染色程序
(2)活细胞的免疫染色程序
5.荧光显微镜检
注意:为保证结果的可靠性应该同时设有对照
阳性对照(正常组织) ;
阴性对照(PBS代替一抗)以证明抗体的特异性。
第二部分 T-cadherin基因克隆和真核表达载体的构建
1.材料:
(1)组织和细胞
(2)菌株与质粒
(3)工具酶
(4)试剂
(5)仪器
2.方法
(1)引物的设计
(2)总RNA的提取:异硫氰酸胍-酚-氯仿抽提一步法
(3)甲醛变性琼脂糖凝胶电泳分析其质量,观察所提RNA有无明显降解;
(4)逆转录RT反应 :为了证实RT反应的成功设管家基因GAPDH为内对照
(5)PCR扩增 :利用上下游引物,在DNA聚合酶下对目的片段进行扩增,PCR过程设beta;-actin为内对照
(6)PCR产物的回收、纯化
(7)PCR产物的克隆
(8)DNA序列测定
(9)真核重组表达质粒的构建
(10)阳性重组质粒的鉴定和筛选
(11)质粒的大量提取
(12)转染黑色素瘤细胞
编辑老师为大家整理了医学科研课题开题报告,希望对大家有所帮助。更多详情请点击医药学论文。
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