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分离介质在线清洗和消毒方法的常规方法
分离介质在线清洗和消毒方法的常规方法
微生物污染物、柱床内沉淀蛋白以及强吸附的顽固蛋白等都会对分
离介质的性能造成影响,严重的会大大降低分离介质的使用寿命。因此,
在线清洗和消毒对层析介质的应用和保养显得非常重要。
Bio-sep类离子交换介质、疏水介质等在使用一段时间(约十个循
环)后,柱床内若有沉淀蛋白或顽固吸附蛋白,就需要在线清洗。可用
0.5-2M的NaOH以50cm/h反向冲洗3-5个柱床体积,然后再用3-5个柱床体
积的平衡缓冲液再生即可。凝胶过滤介质清洗流速可降低,要保证清洗
时间至少在1-2小时,才有较好效果。
对于脂类或疏水性强的杂质一般方法是:用30%-70%的乙醇或
10%-30%的异丙醇浓度递增的方式清洗5-10柱体积,再用蒸馏水洗3个柱
体积即可。或者用0.5%的非离子性去污剂如Triton或吐温(溶于醋酸中)
以合适的流速过1-2柱体积,再用5个柱体积的70%的乙醇或30%的异丙醇
洗,最后用3-5个柱体积的蒸馏水洗。
在线消毒的目的是为了将微生物的感染减少到最低,目前通用的方
法是采用0.5-1M NaOH进行在线消毒,以正常使用时的流速消毒1-2小时,
可除去绝大多数微生物,当然,若刚做完在线清洗,则没必要再做在线
消毒。
西安交大保赛生物技术股份有限公司
电话:029 传真:029
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