高级生物化学-蛋白质2幻灯片.ppt

第五节 蛋白质的理化性质; 一、蛋白质的变性与复性;3、变性理论 1931年,我国生物化学前辈吴宪提出了“蛋白质变性后,其肽链由原来紧密有序的构象变成了松散无序的构象”。这就是变性作用,并且认为天然蛋白质的紧密构造及晶体结构是由分子中的次级键互相联系而形成的,所以容易被物理的和化学因素所破坏,这个观点反映了蛋白质变性本质。; 变性的因素作用机理; 常用的变性剂:尿素; 变性剂:十二烷基硫酸钠(SDS);5、变性蛋白质的特性;有底物存在会抑制变性? 二硫键多蛋白质难变性 胶原蛋白有特殊共价键 纯化一个耐热稳定的酶是否需要低温处理 ? 酶敏感性的概念 ?; 核酸的变性;增色效应;DNA和蛋白质变性的比较; ; ;1、概念:若蛋白质变性程度较轻,去除变性因素后,可缓慢地重新自发折叠成原来的构象,恢复或部分恢复其原有的构象和功能,称??复性(renaturation) 这种变性也称为可逆变性。 2、方法:透析或超滤除去变性剂,或稀释 3、举例:;牛胰核糖核酸酶变性和复性;1 DNA复性(renaturation)的定义 在适当条件下,变性DNA的两条互补链可恢复 天然的双螺旋构象,这一现象称为复性。 热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性,这一过程 称为退火(annealing) 。 2 DNA

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