第三章基因表达的调控基因表达DNA→mRNA→蛋白质的遗传信息.doc

第三章 基因表达的调控 基因表达：DNA→mRNA→蛋白质的遗传信息传递过程 基因表达的调控 基因的活化 基因的“开关”-染色质的活化 一、活性染色质的结构 间期核染色质： 异染色质(heterochromatin)，高度压缩(不转录)； 常染色质(euchromatin)，较为松散， 常染色质中约10%为活性染色质(更开放疏松)。 活性染色质→←非活性染色质 二、活性染色质的结构特点 (一)DNaseI敏感性 转录活性(或有潜在转录活性)的染色质对DNase I更敏感． DNase I超敏感位点(DNase I HyperSensitive Sites，DHSS) (二)组蛋白H3的CyS110上巯基暴露， 三、活性染色质结构的形成 （一)、核小体位相(Phased positioning) 1．核小体的旋转定位(rotational positioning) 指核小体核心与DNA双螺旋在空间结构中的相互关系，主要包括DNA双螺旋的大沟是面向还是背向核心结构． ‘ 2．核小体的平移定位(translational positioning) 指核小体与特定DNA序列的结合位置和方式，特别是转录活性相关的DNA调控元件（启动子、增强子等）序列与核小体的相互位置关系。 (二)、组蛋白修饰 1．H1组蛋白磷酸化 促进染色体包装，影响转录活性， 2．核心组蛋白修饰 乙酰化：常发生在组蛋白的Lys， 一般活性染色质是高度乙酰化的。 （三)HMG蛋白结合 HMG（high mobility group)蛋白—高迁移率蛋白, 如HMG14/HMG17. 与核小体核心颗粒结合，有利转录。 四、DNA甲基化与基因表达 ． (一)、真核生物基因组DNA的甲基化(Methylation) 哺乳动物基因组中5%的C为甲基化(m C)，mC主要存在于CpG二核苷酸中． CpG二核苷酸序列常成簇聚集并零散地分布于人基因组中，形成CpG岛(CpG islands)．人基因组中约每10Kb就有一个CpG岛． CpG岛常与基因相连(可作为寻找基因的标记)。 (二)DNA甲基化的转录抑制作用。 基因表达与甲基化呈负相关 基因甲基化状态： 1、高度甲基化： 基因为持续失活(如女性的一条X染色体； 2、诱导去甲基化：如组织或发育阶段特异性表达基因； 3、持续低水平甲基化：具有转录活性(如持家基因)。 持家基因(housekeeping gene)： 是指对所有类型组织细胞在任何时候都需要其表达的基因，通常都是维持细胞基本生存所必须的基因，其表达常保持在固定的水平。又称为组成性基因(Constitutive gene)。 （三）甲基化与基因组印迹 基因组印迹(genomic imprinting)：指基因表达活性只局限于来自双亲之一的基因版本。 被印迹(imprinted)的基因． 基因组印迹的机制--DNA高度甲基化 基因组印记与肿瘤． 第二节 转录水平的调控 转录水平的调控是基因表达调控中最重要的环节。 一、真核基因转录基本条件： 特异性基因转录的基本条件包括： ①启动子(特别是核心启动子) ②转录模板(转录起始点（+1）---终止点) ③RNA PolⅡ ④普通转录因子(GTFs) (一)启动子(promoter) 与基因转录启动有关的一组DNA序列，一般位于RNA poII转录起始点上游100-200bp以内，其功能是决定转录的起始点和调控转录频率． 启动子区域包括核心启动子和启动子上游近侧序列： 1、核心启动子(core promoter) 是决定转录起始位置的关键序列，也是普通转录因子TFⅡD的结合位点， ①TATA盒(TATA box) 位于转录起始点上游-25～-30bp． ②起始子(initiator，Inr) Inr是与转录起始位点重叠的短的较保守序列． 注：①不是所有基因都含有TATA盒或Inr序列．有的只有其中之一，有的两者都无． ②这些核心启动子的序列和它们之间的间隔多变 2、上游启动子元件(Upstream Promoter element，UPE) 位于较上游(-30一-110bp)，能较强影响转录起始的频率，如CAAT 盒和GC盒．其中GC盒是转录因子SPl的结合位点。 (二)RNA聚合酶Ⅱ 负责真核生物蛋白编码基因的转录(产物mRNA)，有7-10个亚基，最大亚基的羧基末端结构域(CTD)具有7个氨基酸(Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser -Pro-Set)的重复序列，其中有多个磷酸化位点