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實驗二培養基的制備和滅菌.ppt
实验二 培养基的制备和灭菌 ;目 的 要 求;实 验 原 理;培养基的种类;高压蒸汽灭菌;实 验 材 料;实 验 程 序Ⅰ(培养基的配制与分装 );霉菌培养基(察氏一号培养基):300ml/组
1配方:
K2HPO4 0.1% MgSO4.7H2O 0.05% FeSO4 0.001% (加3滴即可) KCL 0.05% NaNO3 0.2% 葡萄糖 3% 琼脂2% 。
2配制:
称量及溶化----加琼脂----定容----分装、加塞、包扎
3分装:
平均分装在两个三角瓶中,包扎、灭菌。;实 验 程 序Ⅱ(准备工作 ); 1.灭菌器内加入一定量水,将包扎好的物品放入其中。
2.接通电源,进行加热。 3.排除高压锅内的冷空气,可将排气阀打开,待排出大气后关闭排气阀;(或关闭排气阀,待压力上升到0.5kg/cm2时再打开排气阀,待压力回复到0时再关闭排气阀。) 4.当压力达1.05kg/cm2时,此时灭菌器内的温度为1210C,维持30min。(对热不稳定的培养基如含有葡萄糖、氨基酸等物时,应适当降低压力,延长时间。) 5.灭菌时间一到,切断电源,待压力降至零时,才能打开排气阀,然后打开灭菌器盖,取出物品。;实 验 程 序 Ⅲ(善后工作 );1、你所作的培养基是否有异常现象出现?试分析其原因。
2、培养微生物的培养基应具备哪些条件?能否以这次试验的方法配制其他培养基?
3、高压蒸汽灭菌开始之前,为什么要将锅内的冷空气排尽?
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