5.3 血红蛋白的提取和分离 同步测试2 人教版选修一.docVIP

PAGE  5.3 血红蛋白的提取和分离 一、选择题(每小题4分，共32分) 1．用凝胶色谱法分离蛋白质时，相对分子质量大的蛋白质(　　) A．路程较长，移动速度较慢 B．路程较长，移动速度较快 C．路程较短，移动速度较慢 D．路程较短，移动速度较快 解析：凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法，当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。 答案：D 2．凝胶色谱分离法分离蛋白质时，凝胶的种类较多，但其作用的共同点是(　　) A．改变蛋白质分子通过凝胶时的路径 B．吸附一部分蛋白质，从而影响蛋白质分子的移动速度 C．将酶或细胞固定在凝胶中 D．与蛋白质分子进行化学反应，从而影响其移动速度 解析：凝胶的种类很多，但所有凝胶均是一些微小的多孔球体，小球内部有许多贯穿的通道，由于不同蛋白质相对分子质量不同，在凝胶中走过的路径不同，因而得以分离。 答案：A 3．相对分子质量不同的蛋白质在凝胶中的分离过程可表示为下图中哪一个(　　) 解析：根据分子筛效应可知，相对分子质量较大的蛋白质分子通过的路程较短，移动速度较快；相对分子质量较小的蛋白质分子通过的路程较长，移动速度较慢。因此，样品中相对分子质量较大的蛋白质先流出，相对分子质量小的分子后流出。 答案：B 4．血红蛋白的提取和分离一般分为四步，符合要求的是(　　) A．粗分离→样品处理→纯化→纯度鉴定 B．粗分离→纯化→样品处理→纯度鉴定 C．样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定 D．纯化→纯度鉴定→粗分离→样品处理 解析：血红蛋白的提取和分离一般可分为四大步，包括样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。 答案：C 5．样品的加入和洗脱的操作不正确的是(　　) A．加样前，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到凝胶面的下面 B．加样后，打开下端出口，使样品渗入凝胶柱内 C．等样品完全进入凝胶层后，关闭下端出口 D．用吸管小心地将1 mL透析后的样品加到色谱柱的顶端，不要破坏凝胶面 解析：加样前，打开色谱柱下端的流出口，使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到与凝胶面平齐。 答案：A 6．使用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳过程中，不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于 (　　) A．电荷的多少　　　　　　　 B．分子的大小 C．肽链的多少 D．分子形状的差异 解析：由于SDS能与各种蛋白质形成蛋白质—SDS复合物，SDS所带负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差异，使电泳迁移率完全取决于分子的大小。 答案：B 7．(2011·广东高考)以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不正确的是(　　) A．洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂 B．猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少 C．血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测 D．在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动慢 解析：猪的成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少，是提纯血红蛋白的理想材料。提纯血红蛋白分四步：红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白溶液、透析，其中洗涤红细胞时，要用生理盐水反复洗涤，既要将红细胞洗涤干净，又要不破坏红细胞，然后再用蒸馏水和甲苯使红细胞破裂，血红蛋白是根据相对分子质量的大小来分离的，相对分子质量大的蛋白质移动速度较快。血红蛋白的颜色可用于观察红色区带的移动情况，据此判断分离效果。 答案：D 8．已知某样品中存在甲、乙、丙、丁、戊五种蛋白质分子，其分子大小、电荷的性质和数量情况如图所示，下列有关蛋白质分离的叙述正确的是(　　) A．将样品装入透析袋中透析12 h，若分子乙保留在袋内， 则分子丙也保留在袋内 B．若用凝胶色谱柱分离样品中的蛋白质，则分子甲移动速度最快 C．若将样品以2 000 r/min的速度离心10 min，分子戊存在于沉淀中，则分子甲也存在于沉淀中 D．若用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子，则分子甲和分子戊形成的电泳带相距最远 解析：分子丙的相对分子质量大于分子乙，所以若分子乙保留在袋内，则丙也保留在袋内；甲相对分子质量最小，容易进入凝胶内部，则移动速度最慢；分子戊的相对分子质量大于甲，所以若分子戊存在于沉淀中，分子甲不一定存在于沉淀中；SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳过程中，蛋白质的迁移速度完全取决于分子的大小，因此，分子甲与丙形成的电泳带相距最远。 答案：A 二、非选择题(共18分) 9．(18分)蛋白质分子中，氨基酸的α－氨基和α－羧基虽然大部分都能结合形成肽键，但是蛋白质分子内仍含有各种酸性基团和碱性基团