生物工艺4课件.pptVIP

4.分批发酵的基础理论 此系统内 dX/dt=μX dS/dt=-qsX dP/dt=qpX X---菌浓，g/L；t—培养时界，h； μ---比生长速率，h-1；S---基质浓度， g/L； qs---比基质消耗速率，g/(g.h)； P---产物浓度， g/L； qp---比产物形成速率，g/(g.h) 5.分批发酵产物形成的动力学 Ⅰ生长关联型产物形成 生长关联型产物通常都直接涉及微生物的产能降解代谢途径，或是正常的中间代谢产物。 酵母发酵生成酒精，以及葡萄糖酸和大部分氨基酸、单细胞蛋白都属于这种类型。 在这种类型的发酵中，微生物的生长、碳水化合物的降解代谢和产物的形成几乎是平行进行的。 产物形成可用得率Yp/x表示 dP/dX=Yp/x 经推导可得 qp=Yp/xμ 表明产物的形成与细胞（菌体）生长关联 Ⅱ 非生长关联型产物形成 非生长关联型的产物一般不是直接或间接来自微生物的产能降解代谢，而是通过次生代谢途径合成的。 在这一类型的发酵中，起初是微生物的初级代谢和菌体生长，而没有产物的合成。此时，营养物质的消耗非常大。 当培养基中的营养物质消耗尽、微生物的生长停止以后，产物才开始通过中间代谢大量合成。 非生长关联型的产物大多数是微生物的次级代谢产物，大多数的抗生素和生物毒素，以及维生素类。 产物形成只与细胞的积累量有关,与细胞生长速度无关 产物形成速率：dP/dt=βX β—比例系数 重要的生长参数 初始基质浓度对菌体生长的影响 较低初始基质浓度范围内：静止期的细胞浓度与基质浓度成正比 X=Y(S0-St) S0-St 表示被有效利用的基质浓度 Y---得率系数 S0---初始基质浓度 St---培养时间t的基质浓度 可预测得到相应菌量所需的初始基质浓度 细胞（菌体）生长与限制性基质浓度的关系可用Monod方程表示： μ= μmaxS/(Ks+S) 上式 反映了限制性基质浓度对细胞（菌体）生长的影响 Ks---基质利用常数 Ks越小，对基质亲和力越大，细胞生长因基质缺乏而受到的影响越小（影响出现越晚） 4.连续发酵动力学 单罐连续发酵时间的确定 若可发酵糖为a，经过t时间发酵后变为代谢产品X，则剩余未发酵糖为a-X；如按一级反应，在对数期其瞬时增长速率为： 三、泡沫的控制 调整培养基成分（如少加或缓加易起泡的原材料） 改变某些物理化学参数（如pH值、温度、通气和搅拌） 改变发酵工艺（采用分批投料） 1.机械消泡：（物理方法） 利用机械振动或压力变化使泡沫破裂。 罐内消泡: 靠罐内消泡浆打碎泡沫。 罐外消泡：靠喷嘴的加速作用消除泡沫。 2.消泡剂消泡 机理: 降低液膜的机械强度 降低液膜的表面粘度 （1）天然油脂类：豆油、玉米油、棉子油、菜籽油（还可作为碳源），用量大，0.1% ? 0.2%。 （2）聚醚类：又称泡敌，消泡能力为豆油的10?20倍，用量少，0.02%-0.03%。 第六节 发酵染菌及其防治 一、染菌的检查、判断 （一）观察法 1. 菌体浓度（OD值）异常（OD:optical density） 2. 溶解氧（DO）异常 3. pH值异常 4. 泡沫过多 （二） 镜检法 （三） 平板划线培养法 （四） 酚红肉汤培养法 二、发酵染菌的原因 1.种子带菌 2.空气带菌 3.设备渗漏 4.培养基灭菌不彻底 5.技术管理不善 三、染菌情况分析 1.单罐染菌 罐本身而非系统问题。如种子带菌、培养基灭菌不彻底、罐有渗漏、分过滤器失效。 2.多罐染菌 系统问题，如空气过滤系统有问题，特别是总过滤器长期没有检查，可能受潮失效；移种或补料的分配站有渗漏或灭菌不彻底。 3.前期染菌 种子带菌、培养基灭菌不彻底。 4.中后期染菌 补料的料液灭菌不彻底或补料管道、阀门渗漏，一般不会是种子问题。 四、噬菌体（phage）染菌及其防治 （一）phage的检查 1. 单层琼脂法 2. 双层琼脂法 3. 平板交叉划线法 4. 液体培养检查法 （二）phage的防治 工艺角度 1. 消灭环境中的phage 2. 药