(2012-0350)凡纳滨对虾血蓝蛋白抗黑曲霉活性讲义.pdf

凡纳滨对虾血蓝蛋白抗黑曲霉活性 刘瑶，陈若泓，王泽焕，陈洁辉，张楠，章跃陵* (汕头大学 理学院生物学系 海洋生物研究所, 广东 汕头 515063) 摘要：本研究以凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）为研究对象，运用亲和层析、SDS、 Western-blotting、抗真菌实验等技术探索对虾血蓝蛋白的抗黑曲菌活性。结果发现，血蓝蛋 白在浓度为 0.1-0.8 mg/ml 时对黑曲霉（Aspergillus niger）生长表现出明显的抑制活性。在 此基础上，选取 0.2 mg/ml 血蓝蛋白作用后的黑曲霉进行显微观察分析。光学显微镜观察结 果表明，血蓝蛋白能抑制黑曲霉孢子生长；扫描电镜分析显示，在血蓝蛋白作用下，黑曲霉 孢子囊萎缩，分生孢子集聚成团，菌丝裂解、扭曲、变短、无分生孢子囊。由此推测，对虾 血蓝蛋白应该具有抗黑曲菌活性，其抗菌机制可能与血蓝蛋白抑制黑曲菌孢子生长和促使病 态菌丝产生等有关。 关键词：对虾；血蓝蛋白；抗黑曲霉活性 Anti-Aspergillus Niger property of hemocyanin from shrimp Litopenaeus vannamei LIU Yao, CHEN Ruo-Hong, WANG Ze-Huan, CHEN Jie-Hui, ZHANG Nan， ZHANG Yue-Ling* (Department of Biology and Marine Biology Institute , College of Science, Shantou University, Shantou, Guangdong 515063, China） 基金项目：国家自然科学基金(Nos、教育部新世纪优秀人才支持计划 项目（No. NCET-11-0922 ）、 广东省自然科学基金(Nos. 10251503101000002 9151064001000001)、广东省科技计划项目(No. 2009B020309006)、广东省高等学校高层次人 才项目（2011）。 作者简介：刘瑶（1988－），女，硕士生，主要从事无脊椎动物分子免疫学研究，E-mail： 10yliu4@stu.edu.cn；* 通讯作者：章跃陵（1971-），男，博士，教授，博士生导师，E-mail： zhangyl@stu.edu.cn. 1 Abstract: In this study, an attempt was carried out to investigate the anti-Aspergillus Niger activity of hemocyanin from shrimp Litopenaeus vannamei. The methods of affinity chromatography, SDS, Western-blotting, antifungal assays, microscope and electron microscopic analysis were used. The results showed that L.vannamei hemocyanin presented anti-Aspergillus Niger activities from the concentration of 0.1 to 0.8 mg/ml. Furthermore, microscope analysis showed that 0.2 mg/ml of hemocyanin could inhibit the growth of Aspergillus Niger spores. Electron microscopic analysis of Aspergillus Niger indicated that the sporangium were atrophied, and