青岛市科技发展计划项目可行性报告-中国临床试验注册中心.doc

青岛市公共领域科技支撑计划 项目申报书 项目名称：双歧杆菌四联活菌片补充对2型糖尿病患者肠道菌群及血清miR-103表达的影响 申报技术领域：人口与健康 主管部门：青岛市卫生和计划生育委员会 承担单位：（盖章） 协作单位：（盖章） 项目负责人：徐倩 起止时间：2016年1月-2017年12月 青 岛 市 科 学 技 术 局 填表日期： 2016 年 1月 25日 研究的立项依据 1.国内外研究概况、水平和发展趋势及存在问题 肠道微生物菌群的鉴定和特征已经成为人类疾病的一个主要研究领域，包括世界范围内最常见的内分泌疾病-2型糖尿病。2型糖尿病是一种受遗传和环境条件影响的复杂疾病，在世界范围内已成为一种主要的公共健康问题。中国深圳华大基因研究院李英睿教授及其团队进行了一项研究，该研究发现2型糖尿病患者特征为中度肠道微生物菌群失调，肠道微生物指标可帮助区分2型糖尿病[1]。肠道菌群失调不仅会产生多种胃肠道疾病如腹泻、便秘、肠炎等，还会诱发肥胖、心血管病、糖尿病和代谢综合征等慢性疾病。近年来关于肠道菌群与2型糖尿病的关系的研究已经成为内分泌代谢领域的热点问题。 2型糖尿病是由遗传和环境因素共同作用引起的一组以糖代谢紊乱为主要表现的临床综合征，其发生的病理生理机制是胰岛素抵抗和胰岛B细胞分泌胰岛素功能障碍，病因仍未完全明确。临床以慢性高血糖为主要特征，可并发多种急慢性并发症，导致器官功能障碍和衰竭，甚至致残致死。目前研究认为，2型糖尿病患者存在一种基本的病理生理改变，即慢性低度炎症状态，具体表现为患者血中的脂多糖(1ipopolysaccharide，LPS)浓度升高，但其滴度远小于败血症状态。这种慢性低度炎症状态通过 TLR4／Myd88等经典信号通路介导肝脏、脂肪组织炎症状态，引起胰岛素抵抗，而肠道菌群在这一过程中起着关键作用[2]。肠道菌群失调通过内毒素导致炎症而引起胰岛素抵抗，是否还影响MicroRNA(miRNA)-103的表达，加重胰岛素抵抗，未见相关的报道。 通过对肠道菌群和2型糖尿病关系的研究不断开展，有学者提出干预肠道菌群可能是今后糖尿病防治领域的重要手段之一。目前研究较多的是生活方式干预或补充有益菌群来影响肠道菌群，从而改善2型糖尿病患者的胰岛素抵抗和高血糖水平。 1.1肠道菌群 肠道菌群(intestinal flora)指寄居于人体肠黏膜表面的细菌和古生菌，与人类共同进化，作为与人类紧密联系的环境因素，参与人体生长发育、生理过程，甚至疾病状态。成人正常肠道菌群由约100～150个种属的细菌组成，其中绝大多数(90％)属厚壁菌门及拟杆菌门，其次是变形菌门，还有少量分属微疣菌门、放线菌门、梭菌、蓝藻菌门、螺旋体门、VadinBE97菌门和古生菌等[3]。肠道菌群通过与人体相互作用，影响人体的营养、物质代谢、免疫系统发生与免疫功能调节、炎症反应、肠道功能，以及血管形成、骨代谢、神经生物行为等，是人类在后天获得并发挥巨大作用，影响人体自稳平衡的重要“器官” [4]。 目前文献证实，肠道菌群可通过影响机体能量平衡，引起全身慢性低度炎症状态，影响肠促胰素分泌等机制，对糖尿病等代谢性疾病的发生产生重要影响[5]。 1.2肠道菌群与2型糖尿病 Larsen等[6]研究发现，2型糖尿病患者肠道内拟杆菌门与硬壁菌门的比值以及普氏拟杆菌与肠球菌的比值与血糖水平呈正相关，与体重指数无关。而且与正常人相比，糖尿病患者粪便中的B-变形菌丰度明显增加。新近利用肠道基因组测序方法(MGWAS)研究了342例中国2型糖尿病患者的粪便发现，糖尿病患者的肠道菌群发生了中度紊乱，某些产丁酸盐细菌丰度降低、条件致病菌增加，而具有硫酸盐还原能力及抗氧化功能的细菌增多[1]。最近Karlsson等[7]对145名 欧洲女性(包括血糖正常、糖耐量异常及糖尿病患者) 肠道菌群研究发现，糖尿病患者肠道菌群的结构和功能与其他组不同。2型糖尿病人群的肠道菌群发生了异常变化。究竟是肠道菌群异常引发了糖尿病，还是在糖尿病的发生、发展过程中宿主代谢的紊乱导致肠道菌群异常还需进一步明确。 研究发现，高脂饮食诱导肠道菌群失调，内毒素血症，引起炎症反应，导致胰岛素抵抗，启动了2型糖尿病的发生。2型糖尿病是结直肠癌的危险因素。Nonaka R等[8]研究发现，miR-103在结直肠癌病人的血清中高表达，可作为生物标志物之一。目前，肠道菌群、miR-103、2型糖尿病、胰岛素抵抗之间的关系，未见相关报道。 1.3肠道菌群与microRNAs 人体肠道菌群在肠腔内形成3个生物层：深层的紧贴黏膜表面并与黏膜细胞粘连形成膜菌群，主要有双歧杆菌和乳酸杆菌组成，属肠共生菌，对宿主健康起重要作用；中层为厌氧菌，包括消化链球菌、韦