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第三章 核酸化学;1. 核酸的化学组成结构及其性质
2. 核酸的测定方法
3. 核酸的研究技术;1868年,F. Miescher从细胞核中分离得到一种酸性物质,即现在被称为核酸的物质。;核酸的种类和分布;;核酸的功能;第一节 核酸的组成成分;;(二)、碱基;;(三)、核苷(nucleoside);腺嘌呤脱氧核苷;(四)、核苷酸(nucleotide);(五).核苷酸衍生物;核酸中也存在一些不常见的稀有碱基。稀有碱基的种类很多,大部分是上述碱基的甲基化产物。;5;;4.肌苷酸及鸟苷酸(强力味精);第二节、RNA的分子结构;;5′PdAPdCPdGPdTOH 3′ 5′PAPCPGPUOH ′
或5′ACGTGCGT 3′ 5′ACGUAUGU 3′
ACGTGCGT ACGUAUGU;(二)、RNA的降解;2.酶法降解;(一)RNA的二级结构;(二)tRNA的三级结构;;第三节 DNA的分子结构;ATGCTG;2.双脱氧法;3.化学修饰法;被测定链的5’ 3’;二.DNA的二级结构;;;
;(五).绞链DNA(hing-DNA 即H-DNA;;三、DNA的三级结构;连环数(linking number):在双螺旋DNA中,一条链以右手螺旋
绕另一条链缠绕的次数.以“L”表示。;第四节 核酸及核苷酸的性质;二.两性性质;4.尿嘧啶
胸腺嘧啶;;三、核酸的紫外吸收特性;四、核酸的变性与复性;;热变性和Tm :;(二). 核酸的复性;(三). 核酸的复性与分子杂交;第五节 核酸及其组分的分离纯化与测定; 破细胞(1mol/LNaCL)
离心去沉淀(含RNA-Pr)
上清(含DNA-Pr)
SDS法/酚法(去蛋白)
离心去沉淀(变性蛋白)
上清(含DNA)
乙醇沉淀
离心收集沉淀(DNA) ;1.离子交换法:;2.凝胶过滤法:; ;(二). 核酸纯度的测定;凝胶电泳;第六节核酸研究的常用技术;二.印迹技术与分子杂交;;;(二).核酸杂交;;;点杂交;三.PCR技术-DNA Polymerase Chain Reaction;(二)PCR技术的应用;(三) PCR技术的特点
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