病毒如何选择-腺病毒or慢病毒.PDFVIP

病毒如何选择 病毒如何选择-腺病毒 or 慢病毒？ 病毒的转导效率比常规真核表达载体高很多，因此特别适合于介导外源基因在难转染甚 至无法转染的哺乳动物细胞中表达。现在常用的病毒有慢病毒、腺病毒、逆转录病毒和腺相 关病毒，我们目前接的项目主要是做慢病毒和腺病毒，这两种病毒在提高基因表达量，缩短 实验周期上各有优势，但是有时可能因为实验目的不同，需要选择合适的病毒进行实验研究， 具体选择何种病毒要可根据这两种病毒各自的特点来决定： 慢病毒： 优点：可以插入细胞基因组，稳定表达，持续时间长； 对细胞活性要求低； 包装周期短（一般要两个月）； 缺点：感染效率相对于腺病毒要低很多； 不能扩增，一次包装的病毒用完后如果再需要只能重新包装，成本高。 一次包装所得到的的病毒滴度也相对较低（10 的 8 次方 pfu/ml），不大适合直 接用于动物实验； 腺病毒： 优点：感染效率高，很多细胞都能达到近 99%； 纯化后的腺病毒可以直接进行动物活体注射； 可以在体外扩增，每次使用完后，可以自己用包装细胞进行扩增，节约成本； 一次包装所得到的滴度较高（纯化后为 10 的 11 次方 pfu/ml，未纯化的为 10 的 10 次方 pfu/ml); 缺点：对细胞活性要求高； 包装周期相对长（一般要两个半月）； 不整合到基因组，无法稳定表达； - 83 - 汉恒生物科技(上海)有限公司 400-092-0065 地址：上海市徐汇区斜土路 1175 号景泰大厦 1503 021 实验室：上海市张江高科技园区张江药谷孵化器 1 号楼 314 汉恒生物科技 邮箱：service@ 病毒如何选择 表达时间相对于慢病毒较短（两三周这样）。 包装腺病毒的周期会比慢病毒长一些，因为腺病毒包装过程相对较繁琐。 但是总体来说，对于很多实验来说，选择腺病毒优势更大，并且很多情况下腺病毒是可以替 代慢病毒来进行实验的： 一、后续实验周期不太长（一个月内）。选择腺病毒比慢病毒效率更高，用慢病毒的话感染 效率不会太高，效率高的话也就 70%到 80%这样，不能直接进行后续实验，需要筛选稳定 细胞株，而筛选稳定细胞株时间至少需要两周时间，筛选过程不顺利的话，需要的时间更多， 会耽误实验。而腺病毒感染效率高，很多细胞的效率可以达到 99%以上，这样就不需要话 费额外的时间筛选稳定细胞株，可直接进行后续实验，对于实验时间和精力上节省很多。 二、目的细胞感染难度大，且后续实验不需要建立稳定细胞株。对于这种情况，当然是强烈 建议用腺病毒，不说腺病毒感染效率会高很多，成本上也会节省很多。比如神经细胞，慢病 毒感染效率估计只有 30%这样，要把感染上的细胞分选出来继续培养才能进行后续实验， 但是很多神经细胞（肿瘤细胞除外）都是不可传代的，如果筛选后几乎剩不了多少细胞，可 能就无法完成后续实验。但是如果用腺病毒就不会出现这样的情况，腺病毒感染效率会比慢 病毒高很多（可以达到 70%左右），这样筛选出来的细胞可以直接进行后续实验，节省了 时间成本。 三、要进行动物实验。动物实验需要的病毒量大，且病毒的滴度要很高，这样才能达到最小 体积注射足够的病毒的目的。这一点，慢病毒肯定没法