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实时荧光定量PCR （Real-time PCR）技术简介;内容;PCR 原理;;荧光嵌合法（非特异性）
SYBR Green I
荧光探针法（特异性）
TaqMan probe
Cycling probe
……;非特异性的荧光嵌合法 —— SYBR Green I;特异性荧光探针法 —— TaqMan probe ;重要术语:
阈值（ Threshold ）：在扩增曲线指数增长期设定的荧光检出界限（第3～15个循环的荧光信号标准偏差的10倍）
C(t)值（Cycle of threshold）：荧光信号（扩增产物）到达阈值时所经过的扩增循环次数;绝对定量
相对定量
;绝对定量;相对定量;Real-time PCR 用途;Real-time PCR 实验 ——以癌细胞药物处理后不同时间点某基因表达量的变化为例;;二 目的和内参基因的选择及引物设计;引物设计注意事项：;三、准备试剂，耗材，预约仪器;四、RNA提取，质量与浓度检测，反转录成cDNA;五、按反应体系准备样品;六、上机设定反应条件，运行程序进行反应;七、从溶解曲线确认PCR反应的特异性;八、获得数据，计算分析结果并做图;谢谢关注，欢迎交流讨论！;聚合酶链式反应PCR原理;常规PK实时PCR;各种荧光检测方法比较;Real Time PCR定量的数学原理;Real-time PCR 用途;Cycling probe;利用Cycleave法的SNP解析原理;利用Cycleave法的SNP解析原理;;标准曲线相对定量法;2-ΔΔc(t) 法
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