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- 2017-04-13 发布于湖北
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高效液相色谱法
LC的特点(与GC比较)
LC仪器基本结构
LC的各种固定相及流动相
多种LC模式的原理、适用对象
HPLC,High Performance LC
4.1 高效液相色谱特点
HPLC与GC比较
对象
GC:气体和低沸点化合物,有机物总数20%
HPLC:高沸点、热不稳定、大分子,80%
流动相
GC:惰性气体,不与组分作用。
HPLC:H = A + Cu。与固定相竞争作用。是改进分离的重要操作条件。
操作温度
GC:高;程序升温。
HPLC:常温;恒温。
W
数据记录/处理
废液或收集
4.2 HPLC仪器结构
进样阀
色谱柱
流动相
高压泵
检测器
一、高压输液系统
HPLC最重要部件
储液罐+过滤器+高压输液泵+压力脉动阻尼器等
高压输液泵:流量、压力平稳,可调范围宽。
恒流泵或恒压泵
恒压泵
保留时间重现性差。
恒流泵
机械注射泵+机械往复泵。
应用最多的是机械往复泵。
输液泵
往复式高压恒流泵
注射泵
浓度
时间
梯度洗脱
邻苯二甲酸二酯的分离
流动相:80%乙腈水溶液
流动相:100%乙腈
0-5 min,70%-90%乙腈;5-10 min,90%-100%;10-18min,100%。
防止柱外效应(进样系统、连接管道及检测器等处)。
二、进样系统
上样位置
进样位置
进样环
接色谱柱
流动相
三、分离系统—色谱柱
柱管+固定相
柱管材
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