发酵工程复习资料 四川理工学院.docVIP

一 发酵工业菌种 1.工厂化生产对菌种的要求？ ①培养基原料来源广、廉价； ②培养条件易控制； ③发酵周期短； ④菌株高产； ⑤抗病毒（噬菌体）能力强； ⑥菌株性状稳定，不易变异退化； ⑦菌体本身不能是病原菌； 2.发酵工业诱变育种的原理？ 诱变育种：以诱发突变为基础的育种，是迄今为止国内外提高菌种产量、性能的主要手段。 用各种物理、化学的因素人工诱发基因突变进行的筛选，称为诱变育种 诱变剂：能够提高生物体突变频率的物质称为诱变剂 物理诱变剂：射线如紫外线、X-射线、γ-射线，快中子； 物理因素中目前使用得最方便而且十分有效的是紫外线。许多高产菌株的选育都用过紫外线，对于一般实验室、中小型工厂都适用，也很安全。 其他的几种射线都是电离性质的，有一定的穿透力，一般都由专业人员在专门的设备中使用，否则有一定危险性。 化学诱变剂： 化学因子如碱基类似物、5-氟尿嘧啶、烷化剂等。 化学诱变剂中使用最多、最有效的是烷化剂。 使用化学诱变剂的优缺点： ①大多数情况下，就突变数量而言，要比电离辐射更有效。 ②化学诱变剂是很经济的，因为只需要少量的合适的诱变剂，设备是实验室的一般玻璃器皿，一个蒸气罩。而用电离辐射进行工作时，设备费用大，并要注意安全性。 ③大部分诱变剂是致癌剂，所以在使用中必须非常谨慎，要避免化学诱变剂与皮肤接触，且切勿吸入其蒸气，有人对某些诱变剂极其敏感，甚至未直接接触就会过敏，这就更要当心。 3.菌种保藏的目的和原理？ （1）目的： ①存活，不丢失，不污染； ②防止优良性状丢失； ③随时为生产、科研提供优良菌种。 （2）基本原理：根据菌种的生理生化特点，人工地创造条件，使菌种的代谢活动处于不活泼状态。 二 发酵工业培养基 1.名词：前体、生理酸性物质、生理碱性物质; 前体：指某些化合物加入发酵培养基中，能直接被微生物合成过程中结合到产物分子中去，而其自身结构并没有多大变化，但是产物的产量却因加入前体而有较大的提高。 生理酸性物质：经微生物生理作用（代谢）后能形成酸性物质的无机氮源。 生理碱性物质：经微生物生理作用后能形成碱性物质的无机氮源。例如：液体曲 2.在利用氨水、尿素作为N源时的注意事项； 氨水 ：碱性强、易挥发、不能加热灭菌，不能加到基础培养基中，只用于流加,且要搅拌。 尿素及有机氮：一般无毒，但尿素使PH↑，灭菌后不稳定造成尿素减少。另有机氮源同时含有 C、N，故兼有C、N的作用。 3.前体的特性？使用时的工艺控制？ 有些前体浓度过高对菌体产生毒性。菌体还具有将前体氧化分解的能力，故需工艺控制。 少量流加 多次加入 加入的时间 4.简述影响培养基质量的因素； ⑴原材料的质量 纯度、原材料的产地品种、加工方法、储存条件、粉碎粒度等。 ⑵配制方法 培养基的配方中应注明的事项： ①计料体积与配料体积的关系 ②物料的规格 ③pH值及调整方法 ④对配制水的要求 ⑤投料的顺序 发酵工业无菌技术 1.试根据对数残留定律，如何确定培养基的灭菌时间?工业生产中采用高温瞬时灭菌的依据。 灭菌操作中，为达到一定的灭菌要求，即 N/N0 为某值，如 10-16。所需灭菌时间即可由下式求出： 该式叫做对数残留公式 以上结论非常重要：在生产上，可利用菌体死灭反应与营养成分被破坏反应的 ΔE差距来作为工艺选取的依据。 通常，菌体死灭反应的ΔE 约在200～400 KJ/mol，而维生素被破坏的ΔE 约在8～100 KJ/mol，灭菌中，温度升高，菌体死灭速度的增加远大于营养成分被破坏的增加；这就是高温短时间灭菌的依据。 2.比较分批灭菌与连续灭菌的优缺点。（书） （补充）有一发酵罐内装 40 m3 培养基、在 121 ℃ 温度下进行实罐灭菌。原感染程度为每 1 mL 有 2 × l05 个耐热细菌芽抱，12l ℃ 时灭菌速度常数为 1.8 min-1。求灭菌失败机率为 0.001 时所需要的灭菌时间。 3.结合本地实际，设计一空气净化流程并对其进行分析。 发酵工业种子制备 简述影响种子质量的主要因素。 1.培养基： 选用原则：组分简单，来源丰富，价格便宜，取材方便等。种子培养基以菌体增殖为目的，应该糖份少而氮源多些。种子罐与发酵罐培养基成分趋于一致时，可缩短发酵生产的周期。 2.培养条件 ①温度：温度直接影响生长和酶的合成； ②pH值：对微生物有明显的影响。培养基pH调节方法：用酸碱溶液中和法；使用缓冲溶液法；使用生理缓冲剂； ③通气搅拌：溶解氧的作用：参与菌体呼吸作用; 搅拌：促进氧的溶解与营养物质及代谢产物的扩散。通气量的多少以溶解氧的多少来衡定。 通气过程中，影响溶解氧的因素：菌种；培养基性质；培养阶段；发酵