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发酵工程复习资料 1.发酵工业的特点： 1．一步生产：微生物发酵是由一系列极其复杂的生化反应组成，反应所需的各种酶均包含在微生物细胞内。 2.反应条件温和 3.原料纯度要求低：常以农副产品作原料，如薯干、麸皮等。原料来源丰富，价格低廉。 4.设备的通用性高:对微生物发酵来说，无论好氧发酵还是厌氧发酵，它们的发酵设备都大同小异，即好氧的一般都用搅拌式发酵罐加空气过滤系统。厌氧发酵都用密封式发酵罐。 5.对环境的污染相对较小：发酵所用的原料是农副产品，废水中虽然生物需氧量（BOD）、化学需氧量（COD）较高，但有毒物质少。 6.生产受自然条件限制小 2.发酵工业常用菌种类型： 细菌: 枯草芽孢杆菌、醋酸杆菌、棒状杆菌、短杆菌等 放线菌: 链霉菌属、小单胞菌属 酵母菌: 啤酒酵母、假丝酵母、类酵母等 霉菌: 根霉、毛霉、犁头霉、红曲霉、曲霉及青霉等 未??养微生物 3.发酵工业对菌种的要求： 能够利用廉价的原料，简单的培养基，大量高效地合成产物 2，有关合成产物的途径尽可能地简单，或者说菌种改造的可操作要强 3，遗传性能要相对稳定 4，不易感染它种微生物或噬菌体 5，产生菌及其产物的毒性必须考虑（在分类学上最好与致病菌无关） 6，生长快，发酵周期短，生产特性要符合工艺要求 7，培养条件易于控制 4.微生物菌种的分离筛选的步骤： 样品采集→样品的预处理→目的菌富集培养→菌种初筛→菌种复筛→菌种发酵性能鉴定→菌种保藏。 5.诱变育种的基本步骤： 出发菌株的选择 处理菌悬液的制备 诱变处理 中间培养 分离和筛选 6.菌种变异及退化机理及其防止措施： 菌种退化主要指生产菌种或选育过程中筛选出来的较优良菌株，由于进行接种传代或保藏之后，群体中某些生理特征和形态特征逐渐减退或完全丧失的现象。 主要原因：基因突变、连续传代。 防止措施:采用减少传代、经常纯化、创造良好的培养条件、用单细胞移植传代以及科学保藏等措施,不但可以使菌种保持优良的生产能力，而且还能使已退化的菌种得到恢复提高。 7.设计适宜于工业大规模发酵的培养基应遵徇的原则：  eq \o\ac(○,1)必须提供合成微生物细胞和发酵产物的基本成分。  eq \o\ac(○,2)有利于减少培养基原料的单耗，即提高单位营养物质的转化率。  eq \o\ac(○,3)有利于提高产物的浓度，以提高单位容积发酵罐的生产能力。  eq \o\ac(○,4)有利于提高产物的合成速度，缩短发酵周期。  eq \o\ac(○,5)尽量减少副产物的形成，便于产物的分离纯化，并尽可能减少“三废”物质.  eq \o\ac(○,6)原料价格低廉，质量稳定，取材容易。  eq \o\ac(○,7)所用原料尽可能减少对发酵过程中通气搅拌的影响，利于提高氧的利用率，降低能耗。 8.碳源作用及常见种类： 1、作用：提供微生物菌种的生长繁殖所需的能源和合成菌体所必需的碳成分 ；提供合成目的产物所必须的碳成分。2、来源：糖类、油脂、有机酸、正烷烃、低碳醇。（特殊情况下，如碳源缺乏时， 蛋白质水解物或氨基酸等也可被微生物视为碳源使用） 9.氮源的作用及种类：主要用于构成菌体细胞物质（氨基酸，蛋白质、核酸等）和含氮代谢物。常用的氮源可分为两大类：有机氮源和无机氮源。 无机氮源种类：氨盐、硝酸盐和氨水 有机氮源种类: 花生饼粉、黄豆饼粉、玉米浆、玉米蛋白粉、蛋白胨、酵母粉等 10.生长调节物质包括 生长因子、前体、产物抑制剂和促进剂 11.培养基类型： （1）斜面培养基（2）种子培养基（3）发酵培养基 12.不同发酵时期染菌对发酵的影响即如何让处理 （1）种子培养期染菌 由于接种量较小，生产菌生长一开始不占优势，而且培养液营养丰富，培养液中几乎没有抗生素（产物）或只有很少抗生素（产物）。因而它防御杂菌能力低，容易污染杂菌。如在此阶段染菌，应将培养液全部废弃。 （2）发酵前期染菌 发酵前期最易染菌，且危害最大。原因 ：发酵前期菌量不很多，与杂菌没有竞争优势；且还未合成产物或产生很少，抵御杂菌能力弱。在这个时期要特别警惕以制止染菌的发生。染菌措施 ： 可以用降低培养温度，调整补料量，用酸碱调pH值，缩短培养周期等措施予以补救。如果前期染菌，且培养基养料消耗不多，可以重新灭菌，补加一些营养，重新接种再用。 （3）发酵中期染菌 发酵中期染菌会严重干扰产生菌的代谢。杂菌大量产酸，培养液pH下降；糖、氮消耗快，发酵液发粘，菌丝自溶，产物分泌减少或停止，有时甚至会使已产生的产物分解。有时也会使发酵液发臭，产生大量泡沫。措施 ： 降温培养，减少补料，密切注意代谢变化情况。如果发酵单位到达一定水平可以提前放罐，或者抗生素生产中可以将高单位的发酵液输送一部分到染菌罐，抑制