实验五固相微萃取气相色谱法用于挥发性有机化合物混合物.docVIP

实验五：固相微萃取气相色谱法用于挥发性有机化合物混合物 的分离与定量分析 一、实验目的 了解固相微萃取及气相色谱仪的基本结构和分离分析的基本原理 了解影响分离效果的因素 掌握定性分析与测定 二、实验原理 固相微萃取 (SPME) 是20世纪90年代初发展的一种集萃取、浓缩、解吸于一体的样品前处理技术。其装置类似于一支气相色谱的微量进样器，萃取头是在一根石英纤维上涂上固相微萃取涂层,外套细不锈钢管以保护石英纤维不被折断,纤维头可在钢管内伸缩。将纤维头浸入样品溶液中或顶空气体中一段时间,同时搅拌溶液以加速两相间达到平衡的速度,待平衡后将纤维头取出插入气相色谱汽化室，热解吸涂层上吸附的物质。被萃取物在汽化室内解吸后,靠流动相将其导入色谱柱,完成提取、分离、浓缩的全过程。固相微萃取技术几乎可以用于气体、液体、固体等样品中各类挥发性或半挥发性物质的分析。 三、实验仪器与分析 仪器：气相色谱仪；全自动空气泵；氮气发生器；氢气发生器；SPB-5毛细管柱30 m×0.32 mm×0.25 μm, 微量注射器；容量瓶；毛细管色谱柱；固相微萃取装置；水浴锅。 试剂：乙醇，正丁醇，乙醇和正丁醇的混合液 四、试验步骤 1、样品及标准溶液的配置：实验室已准备好的乙醇标准溶液、正丁醇标准溶液及乙醇和正丁醇混合的样品溶液 2、开机：依次打开全自动空气泵，氮气发生器，氢气发生器，排出仪器中的剩余空气。等载气稳定后打开氢火焰离子化检测器，最后打开电脑上的工作站。 3、色谱分离条件的设置。 柱箱温度：50℃，进样器温度：200 ℃，检测器温度：200 ℃。分流比：10。尾吹流30 mL/min，氢气流量40 mL /min，空气流量400 mL /min。 4、选择“数据采集”—“下载仪器常数”，待柱箱、FID的温度达到设定温度，依次打开氢气，打开火焰，等GC状态显示“准备就绪”后，点击“单次分析”，再点击“样品记录”，保存路径和文件名。 5、点击“开始”，用微量注射器进样，之后按下面板的START，拔出针。依次进样：乙醇标准溶液，正丁醇标准溶液。用固相微萃取装置提取的乙醇和正丁醇混合液的挥发性物质。 将图表复制到WORD文档，打印出来，观察记录的各峰保留时间，确定各个峰的归属，从而达到定性的目的。 关机。 五、实验数据与结果讨论 图1 乙醇图 表1 乙醇表 峰号 保留时间 面积 面积% 峰高 理论塔板 1 2.7890 100.0000 4655646.0 23879.011  图2 正丁醇 表2 正丁醇 峰号 保留时间 面积 面积% 峰高 理论塔板 1 3.8237 100.0000 3354948.4 11341.271 图3 混合样 表3 混合样 峰号 保留时间 面积 面积% 峰高 理论塔板 分离度 1 2.726 6584058.0 65.5551 2079388.7 20501.137 -- 2 3.669 3459483.6 34.4449 895224.4 26430.182 11.356  数据比较： 备注：以基线为基准：最高的是混合样 中间的是乙醇 最低的是正丁醇 结果分析： 1. 由公式n=16()2及R=2可算得混合样中乙醇与正丁醇的分离度R=11.536，分离效果好。 2.由数据对比可以发现：乙醇样品中的乙醇的保留时间为2.789min,混合样中乙醇的保留时间为2.726min，相差0.063min；正丁醇样品中的正丁醇的保留时间为3.823min,而混合样中的正丁醇的保留时间为3.669min,相差0.154min；相对来说，正丁醇的保留时间差异较大，且正丁醇的峰形不对称，可能是正丁醇的溶液受到污染。 3.根据：在一定操作条件下，进样量m与峰面积A成正比。设:乙醇溶液的浓度为C1，正丁醇溶液的浓度为C2，则混合样中的乙醇浓度为0.4721C1，正丁醇的浓度为0.1858C2。 六、思考题 1、固相微萃取技术相比于传统样品处理方式的优势是什么？ 答：相比于，SPME具有许多优点。它的使用方法简单易行，且样品不需净化，这既能节省时间又可避免样品的损失；它无须使用大量有机溶剂，且SPME熔融石英纤维可重复使用上百次，这既可降低成本又有利于环境保护。总之，SPME技术是一种快速简便、选择性高以及易于实现自动化的新型技术，必将在药物分析、环境保护等领域中发挥作用。2、SPME测定样品时，萃取与哪些因素有关？ 答：（1）纤维涂层的极性和厚度；（2）萃取方法；（3）萃取温度；（4）pH值；（5）无机盐的浓度。