DNA的粗提取与鉴定试用报告-中学生物实验室，高中生物新课标实验室.doc

试剂盒试用报告 基本情况 单位名称 海口市第一中学 申请试剂盒名称 DNA的粗提取与鉴定试剂盒 申请渠道 1.洛阳会议 2.朋友推荐 3.教研组织 4 网络√ 试用背景： 写写您的试用背景，让我们了解您的实验条件，以便日后更好的为您服务。 1、有无生物新课标实验室？ 2、有无相关仪器配备？ 3、是否开展过相关实验？ 学校已建有实验室，但尚未开展本实验。仪器已备齐，由于生物组的老师之前都未做过相关实验，若有能有专业人员先对教师进行相关培训，对我们今后的实验开展将大有益处。 试用过程与结果 实验名称：DNA的粗提取与鉴定 实验原理： 1. DNA在NaCl溶液中的溶解度是随着NaCl的浓度的变化而改变的。 当NaCl的物质的量浓度为0.14 mol／L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。 　　2.DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。 　　3.DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。 实验仪器及实验材料： 研钵、天平、漏斗、纱布、烧杯、酒精灯、玻璃棒、试管、试管夹、95％无水乙醇、香蕉 实验步骤（含操作过程照片）： 1.材料准备：用天平秤取香蕉20g，将香蕉切成小块放入研钵中（如图①）。 2.制备滤液：从试剂盒中将研磨液取出，取3mL研磨液加入研钵中，与香蕉研磨充分。研磨至半流体状态时，将研磨的香蕉糊用漏斗和一层纱布过滤到烧杯中（如图②）。 3.提取DNA：在上述香蕉提取液中，加入与滤液体积相等的4℃冷却的95％无水乙醇。静置1-2min，用玻璃棒朝一个方向轻轻搅拌，就会看到大量白色纤维状粘稠物从溶液中析出，用玻璃棒轻轻卷起（如图③）。 4.鉴定DNA：将试剂盒中的二苯胺试剂B全部取出加入到A中混匀。取两支试管，各加入2mol/L的NaCl溶液5m，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后向两支试管中各加入4mL的二苯胺试剂。混合均匀后，沸水浴10min，观察结果（如图④⑤）。 实验结果（实验结果照片）： 实验结果如图： 实验结果分析： 在沸水浴的条件下，加丝状物的试管（含DNA）遇二苯胺被染成蓝色，而对照组无变色现象。实验过程中，由于香蕉研磨液不易过滤，可加少量蒸馏水，并挤压纱布。 使用试剂盒心得： 课本上传统的实验方法采用鸡血，需要过滤很多遍，学生操作太麻烦，且时间明显不够用。而使用香蕉等植物则明显简化实验过程。使用试剂盒之后确实为老师的实验准备节省很多的时间，方便学生操作，减轻了老师的实验任务。而且，试剂盒配制出的试剂实验效果明显，提高实验成功率。 试剂盒或仪器使用改进意见 试剂盒的量少，学生若操作失误则没有充足的试剂使用，可适当增加试剂量以备用。 海南省海口市第一中学 尹翱翔、陈小燕 2013年3月28日星期四 试剂盒试用报告 基本情况 单位名称 海口市第一中学 申请试剂盒名称 亚硝酸盐含量的测定试剂盒 申请渠道 1.洛阳会议 2.朋友推荐 3.教研组织 4 网络√ 试用背景： 写写您的试用背景，让我们了解您的实验条件，以便日后更好的为您服务。 1、有无生物新课标实验室？ 2、有无相关仪器配备？ 3、是否开展过相关实验？ 学校已建有实验室，但尚未开展本实验。仪器大都齐全，但有关仪器如摇床还欠缺，没有开展过相关实验。 试用过程与结果 实验名称：制作泡菜并检测亚硝酸盐含量 实验原理： 在弱酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸奈乙二胺偶合生成紫红色化合物，颜色的深浅与亚硝酸盐含量成正比，与标准显色液比较定量。 实验仪器及实验材料： 主要仪器：泡菜坛、容量瓶、榨汁机、天平、滤纸、量筒等。 实验材料：黄瓜、白萝卜 实验步骤（含操作过程照片）： 1.制作泡菜：先按4:1的比例配制盐水，煮沸冷却。然后将白萝卜和黄瓜修理、洗净、晾晒、切分成片状，装坛，加入冷却的盐水(如图①)。 2.配制溶液：打开试剂盒，按提示配制氢氧化钠溶液、氢氧化铝乳液、N—1—萘基乙二胺盐酸盐溶液、对氨基苯磺酸溶液、5ug/mL的亚硝酸钠标准液、提取剂及标准显色液（如图②）。 3.样品处理：称取腌制的泡菜40g，用榨汁机粉碎、过滤（如图③④）。取10mL汁液置于50mL容量瓶中，加入20mL蒸馏水、10 mL提取剂，用手振荡。加入4 mL氢氧化钠溶液，加水定容至5 mL（如图⑤），立即过滤。取6 mL滤液，加入氢氧化铝乳液，定容至10 mL，过滤（如图⑥）。 4.测定：吸取4 mL样品溶液，置于10 mL试管中，贴好标签，加入200uL对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置