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【课堂设计】备课精选2015年高中生物12基因工程的原理和技术同步练习含解析浙科版选修3
第2课时 基因工程的原理和技术
目标导航 1.简述基因工程的原理。2.描述基因工程操作的几个步骤。3.举例说出筛选含有目的基因的受体细胞的原理。
一、基因工程的基本原理
1.基本原理:让人们感兴趣的基因(____________)在____________中稳定和高效表达。
2.基因工程的基本要素:多种________、____________、____________和____________等。
二、基因工程的基本操作步骤
1.获得目的基因
(1)目的基因:人们所____________,如人的胰岛素基因、植物的抗病基因等。
(2)获取方法
①如果目的基因的序列是已知的,可用____________合成目的基因,或者用_____(PCR)扩增目的基因。
②如果目的基因的核苷酸序列是未知的,可以从__________中获取。
2.形成重组DNA分子
用________的限制性核酸内切酶分别切割目的基因和载体DNA(如质粒),使其产生相同的____________,然后用____________将两者连接在一起,形成____________。
3.将重组DNA分子导入受体细胞
(1)常用的受体细胞:____________、枯草杆菌、__________和动植物细胞等。
(2)导入方法举例:用质粒作为载体,宿主细胞应该选择____________,用____________处理大肠杆菌,增加其细胞壁的____________,使含有目的基因的重组质粒进入大肠杆菌宿主细胞。
4.筛选含有目的基因的受体细胞
(1)筛选原因:不是所有细胞都接纳了________________。
(2)筛选方法举例:由于质粒上有抗生素抗性基因如________________,所以含有这种重组质粒的受体细胞能够在________的培养基中生长,而没有接纳重组DNA分子的细胞则不能在这种培养基上生长。经过培养,____________能够和质粒一起在宿主细胞内大量______。
5.目的基因的表达:目的基因在____________中表达,产生人们需要的____________。
知识点一 获得目的基因的方法
1.下列属于获得目的基因方法的是( )
①利用mRNA反转录形成 ②从基因文库中提取 ③从受体细胞中提取 ④利用PCR技术 ⑤利用DNA转录
⑥人工合成
A.①②③⑤ B.①②⑤⑥
C.①②③④ D.①②④⑥
2.下列属于PCR技术所需条件的是( )
①单链的核苷酸序列引物 ②目的基因所在的DNA片段
③脱氧核苷酸 ④核糖核苷酸 ⑤DNA连接酶 ⑥DNA聚合酶 ⑦DNA限制酶
A.①②③⑤ B.①②③⑥
C.①②③⑤⑦ D.①②④⑤⑦
知识点二 形成重组DNA分子和导入受体细胞
3.要想将目的基因插入作为载体的质粒中,在操作中应选用( )
A.DNA连接酶
B.同一种限制性核酸内切酶和DNA连接酶
C.限制性核酸内切酶
D.不同的限制性核酸内切酶和DNA连接酶
4.将ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是( )
A.每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒
B.每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酸识别位点
C.每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada
D.每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子
知识点三 筛选含有目的基因的受体细胞和目的基因的表达
5.在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中,下列操作错误的是( )
A.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸
B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体
C.将重组DNA分子导入烟草原生质体
D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
知识点四 基因工程的全过程
6.回答有关基因工程的问题:
(1)构建基因工程表达载体时,用不同类型的限制酶切割DNA后,可能产生粘性末端,也可能产生________末端。若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接,则应选择能使二者产生______(相同、不同)粘性末端的限制酶。
(2)利用大肠杆菌生产人胰岛素时,构建的重组DNA含有人胰岛素基因及其启动子等,其中启动子的作用是
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
在用表达载体转化大肠杆菌时,常用________处理大肠杆菌,以利于表达载体进入;为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA,可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA
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