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微丝的观察-大连理工大学精品课程.ppt

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实验四 细胞骨架的观察;1.实验目的 ;2. 实验原理;2.1 免疫组织化学技术;免疫组织化学的过程;免疫荧光法 ;;2.2 细胞骨架的观察 ;微丝的观察—考马斯亮蓝法;微丝的观察—荧光法;微管的观察—免疫组织化学法 ;2.实验材料 、用品;4.实验步骤;4. 实验步骤;4. 实验步骤;⑥取出样品,放35mm小染色缸内,按下列顺序洗涤,以除去残余的抗血清:PBS→1%Triton X—100/PBS→PBS。每次洗5min,可以放在小型振荡器上轻轻振荡洗涤。然后取出样品,用滤纸吸去水分,略干燥。 ⑦在细胞面上滴加40 μL左右FITC-羊抗兔抗体(用前仍以0.3%Triton X—100/PBS稀释成1:4或1:8)。同步骤5放37℃温育1 h。 ⑧同步骤6洗涤细胞,无离子水洗样品二次。 ⑨略干燥后,用甘油-PBS(9:1)封片。置荧光显微镜下观察,蓝光激发,外加阻断滤片K530。先用低倍镜观察,后转油镜观察。 ;;;;6.注意事项;7.思考题

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