基因编辑技术_生物学_自然科学_专业资料.pptVIP

CELLECTIS S.A. NASDAQ;2015.11.18 DNA剪切技术治疗1岁女童获成功 ;基因组编辑技术简介 Genome Editing;修改遗传信息的第一步： 按我们的设计来重组DNA;第一节 基 本 概 念;重组DNA技术： 是指在基因水平上，将目的DNA在体外重组于能自我复制的载体DNA分子上，然后将重组DNA导入宿主细胞中进行增生，以获得大量的目的DNA片段，或以此为基础，通过基因的诱导表达，得到大量相应蛋白质产物的过程。 又称为分子克隆技术或基因工程技术;第二节 重组DNA技术的发展史;基因工程的诞生;第三节 工具酶;Werner Arber 理论预见限制酶;;Ⅰ型酶、Ⅲ型酶： 具有限制切割与甲基化修饰活性。Ⅰ型和Ⅲ型酶都没有多大的实用价值。;识别位点：即为Ⅱ型酶识别的特殊DNA序列。; ① 5`突出粘性末端 ② 3`突出粘性末端 ③ 平头（钝性末端）;5ˊ突出黏性末端(EcoRⅠ)：; 2、DNA连接酶; 3、DNA聚合酶; （1）5’端标记 （2）制备载体时，用碱性磷酸酶处理后，可防止载体自身 连接，提高重组效率。 碱性磷酸酶有细菌碱性磷酸酶（BAP）和牛小肠碱性磷酸 酶（CIP）。CIP能在 1% SDS溶液中