2.1微生物的实验室培养 学案 人教版选修一.docVIP

PAGE  2.1微生物的实验室培养 学案 人教版选修一 一、培养基 1．概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质 2．营养构成eq \b\lc\{\rc\ (\a\vs4\al\co1(?1?一般都含有水、、无机盐、碳源、氮源,?2?还需满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及O2的要求)) 3．培养基的种类及用途 划分 标准培养基 的种类特点用途物理性质液体培养基不加凝固剂工业生产半固体培养基加凝固剂，如琼脂观察微生物的运动、鉴定固体培养基微生物的分离与鉴定、活菌计数、菌种保藏化学成分天然培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产合成培养基培养基成分明确(用化学成分已知的化学物质配成)分类、鉴定用途选择培养基培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长培养、分离出特定微生物(如在培养酵母菌和霉菌时，可在培养基中加入青霉素；在培养金黄色葡萄球菌时，可在培养基中加入高浓度的食盐等)鉴别培养基根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物，如可用伊红—美蓝培养基检测饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽)特别提醒 自养微生物与异养微生物所需的营养物质不同： ①自养微生物所需的碳源、氮源来自含碳、含氮的无机物，而异养微生物需要的碳源、氮源来自含碳、含氮的有机物，因此可根据培养基中营养物质判断微生物的代谢类型。②含氮无机物不但能给自养微生物提供氮源，也能作为能源物质，提供能量，如NH3既作为硝化细菌的氮源也作为能源。 二、无菌技术 1．消毒 eq \b\lc\{\rc\ (\a\vs4\al\co1(特点：使用较为温和的物理或化学方法仅杀死, 物体表面或内部的部分微生物?不包括芽孢和孢子?,常用方法：煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法)) 2．灭菌eq \b\lc\{\rc\ (\a\vs4\al\co1(特点：指使用强烈的理化因素杀死物体内外, 所有微生物?包括芽孢和孢子?,常用方法：灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌)) 3．消毒和灭菌比较 比较 项目理化因素的 作用强度消灭微生 物的数量芽孢和孢子能否被消灭消毒较为温和部分生活状 态的微生物不能灭菌强烈全部微生物能 三、微生物的纯化培养及菌种的保藏 1．原理 在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。 2．制备固体培养基的流程 eq \x(计算)―→eq \x(称量)―→eq \x(溶化)―→eq \x(灭菌)―→eq \x(倒平板) 3．纯化大肠杆菌的方法 常用的微生物接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。 (1)平板划线法：是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。(如下图示) (2)稀释涂布平板法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。( 如下图所示) ①系列稀释操作(如下图所示) ②涂布平板操作(如下图所示) (3)两种纯化细菌的方法的比较 项目优点缺点适用范围平板划线法可以观察菌落特征，对混合菌进行分离不能计数适用于好氧菌稀释涂布平板法可以计数，可以观察菌落特征吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延适用于厌氧菌和兼性厌氧菌4.培养 接种后的培养皿放入恒温箱内培养 5．菌种保藏 (1)临时保藏eq \b\lc\{\rc\ (\a\vs4\al\co1(操作：采用固体斜面培养基，菌落长成后，放入4 ℃冰箱中保藏，以后每3～6个月，,转移一次新的培养基,缺点：保存时间不长，菌种易被污染或,　产生变异)) (2)长期保存法：甘油管藏法，放在－20_℃下保存 特别提醒 (1)配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的注意事项 ①倒平板的适宜温度是50 ℃左右，温度过高会烫手，过低培养基又会凝固。 ②平板需倒置，这样既可使培养基表面的水分更好地挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。 (2)平板划线操作的注意事项 ①第一次划线及每次划线之前都需要灼烧接种环。 ②灼烧接种环，待其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。 ③划线时最后一区不要与第一区相连。 ④划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基划破。 　微生物培养与分离的考查 1．(2013·江苏)某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。下列叙述正确的是(　　)。 A．培养基分装到培养皿后进行灭菌 B．转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线