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008—1微生物的遗传与变异
第 八 章;第八章 微生物的遗传变异和育种;遗传(heredity inheritance) :;(1)遗传型(genotype);(2)表型(phenotype);表型是由遗传型所决定,但也和环境有关;(3)变异;表型饰变:
指不涉及遗传物质结构改变而只发生在转录、转译水平上的表型变化。;微生物是遗传学研究中的明星:;第一节 遗传变异的物质基础;一、DNA作为遗传物质; 一、3个经典实验 (一)经典转化试验;(1)动物实验;(2)细菌培养试验;(3)S型菌的无细胞抽提液试验;至此,并不知道是夹膜还是核酸。O.T.Avery和他的同事进行了这方面的工作。;Avery在四十年代以更精密的实验设计重复了以上实验;(1)从活的S菌中抽提各种细胞成分(DNA,蛋白质,荚膜多糖等)
(2)对各组分进行转化试验;只有S型细菌的DNA才能将S. pneumoniae的R型转化为S型,且DNA纯度越高,转化效率也越高。说明S型菌株转移给R型菌株的,决不是夹膜多糖,而是以DNA为物质基础的遗传信息。;①加R菌DNA
②加R菌DNA及DNA酶以外的酶
③加R菌的DNA和DNA酶
④加R菌的RNA
⑤加R菌的蛋白质
⑥加R菌的荚膜多糖?
;能用死R菌代替吗?;(二)噬菌体感染实验;该上清液和沉淀中不同比例的放射性是如何形成的?;沉淀中含
25%放射性;在DNA中存在着包括合成蛋白质外壳在内的整套遗传信息。;(三)植物病毒的重建实验;选用TMV和霍氏车前花叶病毒(HRV),分别拆分取得各自的RNA和蛋白质,将两种RNA分别与对方的蛋白质外壳重建形成两种杂合病毒: ;亚病毒的一种:具有传染性的蛋白质致病因子,迄今为止尚为发现该蛋白内含有核酸。;思 考; 三、遗传物质在微生物细胞内存在的部位和方式 (一)7个水平;2. 细胞核水平;3. 染色体水平;(2)染色体倍数;4. 核酸水平;5. 基因水平;(原核);乳糖操纵子 lac operon;6. 密码子水平;7. 核苷酸水平;(二)原核生物的质粒 1. 定义和特点;cccDNA;另一类质粒的复制与核染色体的复制不同步,
在这类细胞中,一般含10~15个或更多质粒。;通常以共价闭合环状(covalently closed circle,简称CCC)的超螺旋双链DNA分子存在于细胞中;; 提取所有胞内DNA后电镜观察;;质粒的主要功能:;(1)F质粒(F plasmid);携带F质粒的菌株称为F+菌株(相当于雄性),
无F质粒的菌株称为F-菌株(相当于雌性)。;(2)R质粒(R plasmid);含调节DNA复制和拷贝数的基因以及转移基因,相对分子量约11×107,具有转移功能;;R100质粒(89kb)可使宿主对下列药物及重金属具有抗性:
汞(mercuric ion ,mer)
四环素(tetracycline,tet )
链霉素(Streptomycin, Str)、
磺胺(Sulfonamide, Su)、
氯霉素(Chlorampenicol, Cm)
夫西地酸(fusidic acid,fus)
并且负责这些抗性的基因是成簇地存在于抗性质粒上。;(3)Col质粒(colicin plasmid,col plasmid);细菌素结构基因、
涉及细菌素运输及发挥作用(processing)的蛋白质的基因、
赋予宿主对该细菌素具有“免疫力”的相关产物的基因;细菌素一般根据产生菌的种类进行命名:;(4)Ti质粒(tumor inducing plasmid); Agrobacterium tumefaciens(根癌土壤杆菌或根癌农杆菌)释放出的Ti质粒上的T-DNA片断与植物细胞的核基因组整合,合成冠瘿碱类(opines),破坏控制细胞分裂的激素调节系统,使之变成癌细胞。;(5)Ri质粒(root inducing plasmid);(6)mega质粒(megaplasmid);(7)降解质粒;降解质粒以其所分解的底物命名,
例如,
CAM(樟脑)质粒,
OCT(辛烷)质粒,
XYL(二甲苯)质粒,
SAL???水杨酸)质粒,
MDL(扁桃酸)质粒,
NAP(萘)质粒,
TOL(甲苯)质粒等;“超级菌”
通过遗传工程手段构建具有数种降解质粒的菌株,具有广谱降解能力的工程菌。;
下节课再见了……
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