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;第七章微生物发酵产酶;酶的生产方法;Contents of chapter 2;2.1 酶生物合成过程 The biosynthesis process of Enzyme;Reverse transcription;Replication 复制：亲代DNA或RNA在一系列酶的作用下，生成与亲代相同的子代DNA或RNA的过程。 Transcription 转录：以DNA为模板，按照碱基配对原则将其所含的遗传信息传给RNA，形成一条与DNA链互补的RNA的过程。 Translation 翻译：亦叫转译，以mRNA为模板，将mRNA的密码解读成蛋白质的AA顺序的过程。 Reverse translation 逆转录：以RNA为模板，在逆转录酶的作用下，生成DNA的过程。;2、RNA的生物合成(转录)- Transcription;转录过程的特点;The E. coli RNA polymerase holoenzyme consists of six subunits: a2bb’? s.;转录过程;本节 目录;3、蛋白质的合成(翻译)-Translation;蛋白质合成的几个要素-mRNA(模板，template);蛋白质合成的几个要素-遗传密码，nucleotide triplet codon;;;蛋白质合成的几个要素- 转运RNA (transporter);酪;蛋白质??成的几个要素-核糖体，ribosome;The ribosome composition of prokaryotic and eukaryotic cell;蛋白质合成的几个要素-其他因子和酶;蛋白质的合成过程;氨基酸活化生成氨酰-tRNA ;原核生物肽链合成的起始阶段是在GTP和起始因子（Initiation Factor）的参与下，核糖体30 S亚基，fMet- tRNAF ，mRNA和50 S 亚基结合，组成起始复合物的过程。主要包括5个步骤： （1）30 S亚基与起始因子IF3 结合； （2）30 S亚基与mRNA结合，形成30 S-IF3-mRNA复合物； （3）fMet- tRNAF 与起始因子IF2以及GTP结合，生成fMet- tRNAF -IF2-GTP； （4）在起始因子IF1的参与下，fMet- tRNAF-IF2-GTP与30 S-IF3-mRNA结合生成30 S起始复合物。在此30 S起始复合物中，fMet- tRNAF上的反密码子正好与mRNA上的起始密码子AUG结合； （5）50 S亚基与上述30 S起始复合物结合，形成完整的70 S核糖体。同时放出IF1，IF2，IF3 ，并使GTP水解生成GDP和Pi。在此70 S核糖体形成时，fMet- tRNAF 位于70 S核糖体的“P”位（肽酰基位），而它的“A”位（氨酰基位）是空位。 ;进位;合成终止;高效率的蛋白质合成体系;蛋白质的空间结构如何形成？ 功能与结构如何统一？ 体外、体内的结构如何变化？ 蛋白质分子设计及蛋白质工程的需要 越来越多的基因工程产物需要复性复活, 要求蛋白质折叠的理论及技术的指导。基因工程重组蛋白类产物必须要形成正确的折叠才能表现出功能和活性。;4、酶生物合成的调节 (regulation);A B;酶在细胞内的含量取决于酶的合成速度和分解速度。细胞根据自身活动需要，严格控制细胞内各种酶的合理含量，从而对各种生物化学过程进行调控。 酶浓度调节的化学本质是基因表达的调节。在细胞内，所合成的酶的种类及数量是由特殊的基因信息决定的。DNA所携带的酶蛋白遗传信息，需要通过转录和翻译而合成酶蛋白。在细胞内进行的转录或翻译过程都有特定的调节控制机制，其中转录的调控占主导地位。因此，基因表达的调控主要在转录水平上进行。;酶合成诱导的现象—Jacob and Monod的工作： 已知分解利用乳糖的酶有：?-半乳糖苷酶； ?-半乳糖苷透过酶；硫代半乳糖苷转乙酰酶。 实验： 1.大肠杆菌生长在葡萄糖培养基上时，细胞内无上述三种酶合成； 2.大肠杆菌生长在唯一碳源乳糖培养基上时，细胞内有上述三种酶合成；当换成葡萄糖培养基时，三种酶基本消失； 3.表明菌体生物合成的经济原则：需要时才合成。 ;酶合成阻遏的现象—Jacob and Monod的工作： 实验： 1.大肠杆菌生长在无机盐和葡萄糖的培养基上时，检测到细胞内有色氨酸合成酶的存在； 2.在上述培养基中加入色氨酸，检测发现细胞内色氨酸合成酶的活性降低，直至消失。 3.表明色氨酸的存在阻止了色氨酸合成酶的合成，体现了菌生长的经济原则：不需要就不合成。 ;乳糖操纵子的结构;诱导机