AYL-S7-304 放线杆菌属、艾肯菌属、金氏杆菌属、心杆菌属和色杆菌属常规鉴定3.0.doc

安徽医科大学第一附属医院检验科 作业指导书文件编号: AYL-S7-304版本:3.0页码: 第 PAGE 6页 共6页 编写者：沈继录审核者： 批准人： 生效日期：2012.1.1文件发放范围：微生物组文件年度审核审核者：审核者：审核者：审核者：日期：日期：日期：日期：放线杆菌属、艾肯菌属、金氏杆菌属、心杆菌属和色杆菌属常规鉴定 1．概述 　　放线杆菌属、艾肯菌属、金氏杆菌属、心杆菌属和色杆菌属均为兼性厌氧革兰阴性杆菌，除色杆菌属外，营养要求较高，在含血液琼脂平板或巧克力平板上才能生长，需5%~10%CO2,在肠道培养基和无血清培养基或克氏双糖铁（KIA）中皆不生长，无鞭毛，革兰染色着色不均匀。 放线杆菌属 呈球形（0.3~0.5μm×0.6~1.4μm）或短杆状；孵育24h后，形成光滑、圆形、凸起、淡蓝色、直径2mm菌落，或粗糙型菌落。牢固黏附于琼脂上不易刮脱。伴放线杆菌菌落随培养时间延长，呈星状发射样皱纹；在液体培养基中，菌落形成颗粒黏附管壁。该属菌株发酵葡萄糖产酸不产气，多数菌种氧化酶、触酶、脲酶阳性。 艾肯菌属 大多呈细长、笔直、两端圆、长1.5~4μm革兰阴性杆菌，在血琼脂平板培养48h后形成直径1~2mm的菌落，中心向琼脂深层凹陷，边缘侵蚀状生长，有次氯酸气味，数天后变淡黄色。生化反应不活泼，不分解糖类，氧化酶阳性，硝酸盐还原试验阳性，触酶、脲酶、吲哚阴性。 金氏杆菌属 为革兰阴性（0.4μm×2~3μm）短小杆菌，成对或短链状排列。在血琼脂平板上培养48h形成1~2mm两种不同类型菌落；一种琼脂蚀痕凹陷，菌落边缘呈蔓延状生长；另一种中间凸起，无凹陷和蔓延状。金氏杆菌有狭小的β-溶血环；氧化酶阳性，触酶、脲酶、苯丙氨酸脱氢酶、吲哚、枸橼酸盐、明胶及DNA酶均阴性。发酵葡萄糖须在培养基中补充营养物质。 人类心杆菌 革兰阴性（0.5~0.75μm×1~3μm）杆菌，染色不规则，具有多染性，单个或成对、有时呈短链或葡萄状排列，培养环境需保持一定的湿度，在血琼脂平板上孵育48h后，菌落呈圆形、凸起、直径1mm，凹陷嵌入琼脂。发酵葡萄糖产酸不产气，氧化酶、吲哚阳性，触酶、脲酶阴性。 紫色色杆菌 革兰阴性（0.8~1.2μm×2.5~6.1μm）杆菌，端极鞭毛1~4根或侧生鞭毛，有动力。营养要求不高，在普通琼脂培养基上30~35℃，培养24h，菌落1~2mm，圆形、光滑、湿润，呈鲜艳紫罗兰色，可有β-溶血环。某些菌株不产色，发酵葡萄糖、果糖产酸不产气，不分解乳糖、木糖、甘露醇，硝酸盐还原、枸橼酸盐利用、液化明胶试验均阳性，多数菌株氧化酶阳性，触酶阳性。 2．常规鉴定 放线杆菌属菌种氧化酶阳性、发酵葡萄糖，动力阴性，易与嗜血杆菌、巴斯德菌属混淆，鉴定特点为血琼脂上发育缓慢，菌落具有发射状皱纹，粘稠不易刮取。其生化特性见表1。 啮蚀艾肯菌鉴别要点是不分解糖类，鸟氨酸脱羧酶阳性，硝酸盐还原试验阳性，其生化特性及相关菌种鉴别见表2。 金氏杆菌属与其他正常菌群混合检出较困难，可用含克林霉素或万古霉素的选择性培养基，血培养仪能培养出体液中的金氏杆菌。鉴定时应注意与奈瑟菌某些菌种区别，见表3。 人类心杆菌鉴定依据为革兰阴性杆菌，多形性，氧化酶阳性，发酵葡萄糖，吲哚阳性（反应较弱，应选择色氨酸丰富的培养基延长孵育时间（2天），并用二甲苯浓缩靛基质）。生化特性及鉴别见表2。 紫色杆菌因产紫色杆菌素很容易与其他细菌鉴别，但不产色素菌株需与气单胞菌属细菌鉴别：本菌赖氨酸脱羧酶阴性，不分解麦芽糖、甘露醇，可与之区别。 3．抗菌药物敏感试验和抗菌药物敏感性 　　上述各菌属菌种当前尚无抗菌药物敏感试验标准操作方法和解释标准。 　　有报告放线杆菌属对青霉素、头孢菌素、四环素、氟奎诺酮类敏感，但也有部分产β-内酰胺酶菌株。金氏杆菌对β-内酰胺类、四环素、大环内酯类、复方新诺明和奎诺酮类抗菌药物敏感，产β-内酰胺酶菌株对含克拉维酸复合制剂抗菌药物敏感。人类心杆菌对克林霉素耐药，对其他抗菌药物敏感，已有报道部分菌株产β-内酰胺酶。紫色色杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药，氨基糖苷类敏感性不定，环丙沙星、复方新诺明、四环素、亚胺培南敏感。 4．结果报告和解释 　　嗜血杆菌属、放线杆菌属、心杆菌属、艾肯菌属、金氏杆菌属细菌统称为HACEK群细菌，均为人类口腔正常菌群，主要引起心内膜炎。该类菌种引起心内膜炎，病程较长（2周~6个月），赘生物大，易形成栓赛；血液培养生长慢（约6天），瓣膜受损害严重。紫色色杆菌主要寄生在水、土壤及腐败有机物，人类通过水和土壤等感染伤口和创面，亦有经食物进入人体，引起腹泻、泌尿道感染、败血症、脑膜炎等，以儿童多见。 表1 放线杆菌属与嗜沫嗜血杆菌的生化特性 试验伴放