【中国药科大学】抗体糖组学.doc

抗体—— 一. 二．抗体水解 1.木瓜蛋白酶的水解片段 （1）裂解部位：IgG铰链区H链链间二硫键近N端侧切断。 （2）裂解片段：①两个Fab段（抗原结合段） ②一个Fc段（可结晶段） 2.胃蛋白酶的水解片段 （1）裂解部位：铰链区H链链间二硫键近C端切。 （2）裂解片段：①F(ab′)2包括一对完整的L链和由链间二硫键相连一对略大于Fab中Fd 的H链，称为Fd′含235个氨基酸残基；F(ab′)2具有双价抗体活性。 ②Fc可继续被胃蛋白酶消化成更小的片段，失去其生物学活性。 抗体的生物学功能 抗体是体液免疫应答中发挥免疫功能最主要的免疫分子； 1特异性地结合抗原 2活化补体 3结合Fc受体，发挥不同的生物学作用 （1）介导Ⅰ型变态反应 （2）调理吞噬作用 （3）发挥抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用（ADCC效应） （4）通过胎盘 抗体的治疗机制 （1）中和作用：用于感染性疾病，使病原体或其产生的毒素丧失致病力。 （2）示踪或导向作用：使与其相连的功能性分子特异性地激活或封闭、破坏靶细胞或靶分子。 （3）竞争性抑制作用/拮抗作用：与体内产生或体外进入的物质结合，阻止其与靶分子作用产生毒性损害。 （4）抗体依赖性细胞介导的细胞毒效应（ADCC）及补体依赖性细胞溶解作用（CDC） （5）通过内影像作用模拟抗原，使疫苗更具安全性及广泛性 五．鼠源单抗的使用限制 （1）鼠源性单克隆抗体的免疫原性 （2）半衰期短 （3）靶吸收差 （4）生产复杂，价格昂贵 六．基因工程抗体（Gene Engineering Ab） 鼠单克隆抗体的人源化的两个基本的原则 （1）保持或提高抗体的亲和力和特异性； （2）大大降低或消除抗体的免疫原性。 A.人-鼠嵌合抗体:（Human-mouse Chimeric Ab）用人C区取代鼠C区，可以较好解决鼠 源性单克隆抗体诱发HAMA等不良反应，延长单克隆抗体的半衰期， 改善单克隆抗体的药物动力学。 B.改型抗体:（Human izationAntibody）又称人源化抗体,把嵌合抗体的鼠FR区替换成人 FR区，则可能减少单克隆抗体的免疫原性。 C.小分子抗体:（Small Molecular Ab）完整的抗体分子，相对分子质量较大，难以穿过血 管壁，影响了靶部位对其的摄取。小分子抗体可分为Fab抗体、单链抗体、 单域抗体、超变区多肽等四种。 （1）Fab抗体:抗体的Fab段由重链V区（VH）及CH1功能区与轻链间以 二硫键形式连接而成，主要发挥抗体的抗原结合功能。 （2）单链抗体:(Single chain Ab)在重链V区cDNA3′端与轻链V区cDNA5 ′端之间，用一寡聚核苷酸接头（linker，14-25个aa为宜） 连接成单链可变区基因片段，再与相应的载体体外重组，转化 至受体细胞，表达出一具有抗原结合能力的单链抗体多肽。 （3）单域抗体:（Single domain Ab)只有VH 或VL 一个功能结构域.单域抗 体的相对分子质量更小，更容易穿过靶组织，但由于VH单域 抗体不含有VL片段，VH的疏水面暴露较大面积，致使其抗 原亲和力大幅度下降， 非特异性吸附有所增加。 （4）超变区多肽：（hypervariable region polypeptide）只含有一个CDR多肽 的抗体。相对分子质量很小，对组织细胞具有极强的穿透 性，但是由于只含有一个CDR区，它的结合抗原能力是