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PAGE  PAGE 14 第一节 蛋白质 一、蛋白质含量的测定 凯氏定氮法——蛋白质中氮含量约为 ，即1克氮所代表的蛋白质约为 克。 二、氨基酸的结构 蛋白质的水解产物为 α 氨基酸（除 除 脯 氨酸） 除 除 甘 氨酸，氨基酸都有不对称碳原子，分为D—型、L—型，天然蛋白质中的氨基酸为 天然蛋白质中的氨基酸为 L 型。 甘氨酸 丝氨酸 糖基化 苏氨酸 酪氨酸 甲状腺激素 天冬酰胺 半胱氨酸 谷氨酸 天冬氨酸 赖氨酸 精氨酸 组氨酸 甲硫氨酸 乙烯 色氨酸 生长素 三、氨基酸的性质 1、氨基酸的两性离子形式 2、氨基酸的等电点（pI）及计算 3、氨基酸的存在形式 溶液pH等于等电点时， ； 溶液pH小于等电点时， ； 溶液pH大于等电点时， 。 四、蛋白质的结构 1、N端、C端 书写习惯： 左端N端，右端C端 2、 空间结构（构象）一级结构二级结构三级结构四级结构化学键肽键氢键疏水键 3、二级结构类型： （1）α螺旋 每 3.6 个氨基酸上升一圈，每圈高度为 0.54nm . 链内氢键 （2）β折叠 平行、反向平行 链间氢键 （3）β转角 （4）无规卷曲 五、蛋白质的分类 1、根据分子形状 球状蛋白质：易溶解 纤维状蛋白质：不溶于水 2、根据组成 单纯蛋白质 缀合（结合）蛋白质：色蛋白、糖蛋白、核蛋白、脂蛋白、磷蛋白 六、蛋白质胶体性质 原因 半透膜透析 七、酸碱性质 等电点 电泳 八、蛋白质沉淀 非变性沉淀 变性沉淀 九、蛋白质的分离、纯化 1、透析法 根据蛋白质分子大小 2、凝胶过滤 根据蛋白质分子大小 大分子选被洗脱出来，小分子后被洗脱出来 3、等电点沉淀法 根据溶解度差别 4、盐析法 根据溶解度差别 5、有机溶剂沉淀法 根据溶解度差别 6、电泳法 如聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE） 根据电荷、大小不同 7、离子交换层析： 根据电荷不同 纤维素离子交换剂 阳离子交换：羧甲基纤维素（CM—纤维素） 阴离子交换：二??氨乙基纤维素（DEAE—纤维素） 8、亲和层析 蛋白质与特异的配体相结合 抗原—抗体 激素—受体 酶—底物 酶—抑制剂 十、特异蛋白质的定位 1、免疫荧光技术 原理：抗原—抗体特异性结合、荧光标记技术 2、免疫电镜技术 原理：抗原—抗体特异性结合、电子显微镜 免疫球蛋白 类型：IgA、IgD、IgE、IgG、IgM IgA：含量最多，占80% IgD： IgE：与抗过敏有关 IgG：唯一能通过胎盘的抗体 IgM：构成 HYPERLINK /view/2142732.htm \t _blank B细胞抗原受体 胶原蛋白 含量：动物体内最丰富的蛋白质，占1/3 分布：皮肤、肌腱、韧带 组成：原胶原蛋白——3条多肽的三股螺旋——每股为左手螺旋 第二节 酶 一、酶的结构 1、单纯酶和结合酶 2、全酶＝酶蛋白+辅因子（辅酶或辅基） 3、辅因子 全属离子，小分子有机物 作为电子、原子或某些基团的载体 4、辅酶与辅基的区别： 5、一种辅酶常可与不同的酶蛋白结合，可见酶的专一性是由酶蛋白决定 二、酶根据结构的分类 1、单体酶 只有一条肽链 全部为水解酶 2、寡聚酶 由多个亚基组成 多为糖代谢酶 3、多酶络合物 一般由2~6个功能相关的酶嵌合而成的络合物 如丙酮酸脱氢酶复合物 三、酶的结构与功能的关系 1、活性部位（活性中心）：结合部位+催化部位 2、酶原的激活 实质是酶活性部位形成或暴露的过程 胰蛋白酶：被肠激酶或胰蛋白酶本身所激活 胃蛋白酶：被盐酶或胃蛋白酶激活 3、可逆的共价修饰调节（酶的化学修饰） 某种酶在其他酶的催化下，其肽链中某些基团发生可逆的共价修饰作用，导致该酶在活性形式和非活性形式间转变。 与别构调控不同，可逆的共价修饰是酶对酶的作用，不是小分子效应物对酶的作用。 共价修饰：磷酸化、腺苷酰化、尿苷酰化、ADP—核糖基化、甲基化等 4、别构调控 酶的调节部位与某些化合物可逆的非共价结合，使酶结构改变。 别构酶 效应物——激活剂或别构抑制剂 四、酶的作用机制 降低反应活化能 中间产物学说 诱导契合学说 五、酶促反应 1、米氏方程式 v= 2、米氏常数的意义 反应速度为最大反应速度一半时的底的浓度 Km小，代表酶和底物亲和力强；Km大，代表酶和底物亲和力弱 六、抑制剂对酶作用的影响 1、不可逆抑制作用 2、可逆抑制作用 （1）竞争性抑制作用 v=，其中a=1+ Km变大，Vmax不变 （2）非竞争性抑制作用