抗原和抗体的制备研讨.ppt

免疫学技术有在食品安全 检测中的应用;第一节抗原的准备;抗原制备的主要技术途径;天然抗原的制备;颗粒抗原的制备; 绵羊红细胞的制备流程图;颗粒抗原的制备; 细菌细胞抗原的制备流程图; 种类：蛋白质多糖和细菌毒素。 细胞内存在的部位：胞外抗原和胞内抗原。 胞外抗原:收集培养液或分泌物。 胞内抗原:提取、分离和纯化。;胞内抗原的提取、分离和纯化; ;1、酶处理法;2、冻融法;3、超声破碎法;4、表面活性剂处理法;抗原的纯化;1、超速离心法;2、选择性沉淀法;3、凝胶层析法;凝胶层析（分子筛）;4、离子交换层析法;离子交换层析;5、亲和层析法;正常细胞 ＋;亲和层析;抗原的鉴定;半抗原免疫原的制备;半抗原 ;载体类型; 半抗原-载体连接方法1;混合; 半抗原-载体连接方法3; 半抗原-载体连接方法4;  佐剂; （二）常用佐剂的种类和制备; 2.明矾佐剂;作用大于不完全佐剂 局部形成肉芽种和溃疡 不能用于人体; ;人工抗原及基因工程抗原;人工合成抗原;基因工程抗原;小结; 第二节 抗体的制备;多克隆抗体的制备;免疫动物的选择;免疫方法;1.颈动脉放血法 2.心脏采血法 3.静脉采血法;免疫血清的分离和保存;特异性抗体的纯化;特异性IgG抗体的纯化;特异性抗体的鉴定;亲合力; 单克隆抗体技术; 杂交瘤技术的原理及流程;HAT培养基是含有次黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)、胸苷(T)和甘氨酸的完全培养基。在氨基蝶呤(二氢叶酸类似物)存在下，这种酶缺陷的细胞不能通过核苷酸合成旁路合成次黄嘌呤和胸苷。 制备单克隆抗体的方法是用缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转化酶或胸腺嘧啶核苷酸酶的瘤细胞变异株与脾脏的B细胞融合。 融合的杂交瘤细胞由于脾淋巴细胞具有次黄嘌呤磷酸核糖转化酶，可以通过次黄嘌呤合成DNA，克服氨基喋呤的阻断，因此杂交瘤细胞大量繁殖而被筛选出来。B淋巴细胞在一般培养基中不能长期生长，一般于二周内均死亡。 PEG：聚乙二醇;单克隆抗体的特性;基因工程抗体(Genetic engineering antibody);一. 嵌合抗体(chimeric antibody);二. 单链抗体(single chain antibody);三. 人源化抗体(humanized antibody);小结;作业