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凝集反应-沉淀反应-补体参加反应
实验内容
介绍:免疫学检测技术
示教:单扩、双扩、火箭电泳
操作:对流免疫电泳、玻片凝集
报告:三张图、两实验原理及结果;一、抗原抗体反应的原理
1、基础:抗原决定基——抗体的互补决定区
2、特点:抗原抗体反应的特异性
抗原抗体反应的可逆性
抗原抗体反应的可见性;二、抗原或抗体的检测方法
凝集反应、沉淀反应、补体参加的反应、
免疫标记技术;凝集反应
概念:抗原 + 抗体 凝集团块
直接凝集:颗粒性抗原 + 抗体 凝集团块
玻片法、试管法;间接凝集:可溶性抗原包被于载体 + 抗体 凝集团块
反向间接凝集:抗体包被于载体 + 抗原 凝集团块
协同凝集:抗体结合金葡菌SPA + 抗原 凝集团块
抗球蛋白试验:抗原 + 不完全抗体 + 抗球蛋白抗体
凝集团块;Evaluation only.
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Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;沉淀反应
概念:可溶性抗原 + 抗体 沉淀物
单向免疫扩散、火箭电泳:抗原定量试验
抗体琼脂板、抗原扩散(自由、定向)
双向免疫扩散、对流免疫电泳:抗原分析、
抗原定性试验等
抗原、抗体同时扩散(自由、定向);单向免疫扩散
单向免疫扩散试验是一种定量试验。
将一定量已知抗体混于琼脂中,制板,在适当位置打孔,将抗原加入孔中扩散,与板中抗体相遇,在比例合适处呈现白色沉淀环,环的直径与抗原含量成正比。
主要用于测定血清各种Ig和补体成分的含量;Evaluation only.
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Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;单向定量免疫电泳(火箭电泳)
将一定量已知抗体混于琼脂中,制板,在板的一端打一排小孔,加入待检样品,置于阴极端进行电泳。抗原在泳动过程中与抗体在比例合适部位形成锥形沉淀峰,状如火箭,称火箭电泳。沉淀峰的高低与抗原的浓度成正比。
敏感度与单扩相仿,但需时较短。;Evaluation only.
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Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;双向免疫扩散
在琼脂板上打孔,抗原和??体分别加到相应孔中,二者自由向四周扩散,在比例合适处形成沉淀线。若同时含有若干对抗原抗体系统,可出现多条沉淀线。
可用于分析和鉴定标本中多种抗原成分;Evaluation only.
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Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;对流免疫电泳;对流免疫电泳
打孔:金属打孔器打两排孔,抗原孔与抗体孔间距离为4毫米至5毫米。
加样:抗AFP血清加于抗体孔内;病人血清、AFP阳性血清、阴性对照血清分别加于抗原孔内。
电泳:将琼脂板置电泳槽,抗原孔置阴极端。板两端分别用湿纱布与缓冲液相连,通电20分钟。
观察:在相应抗原、抗体孔间出现沉淀线。
玻片刮去琼脂后交到讲台方盘内。;对流免疫电泳;对流免疫电泳;Evaluation only.
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Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;直接凝集反应——玻片凝集;实验报告
三张图:单扩、双扩、火箭电泳
原理及结果:对流免疫电泳、玻片凝集
(结果可用图示)
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