2第2讲第1章基因工程概述9.1(周四).pptVIP

第二讲 2011.9.1（1-2节） 第一章 基因工程概述 第二节基因工程研究发展史 第三节 基因工程研究内容 第四节 基因工程技术的意义;第二节 基因工程研究发展史;Francis Crick James Watson;“中心法则”。1958年Crick在DNA双螺旋学说基础上提出。;遗传密码的破译。1961年Nirenberg用人工合成mRNA破译出第一个遗传密码到1969年确定全部遗传密码，人们了解了大多数生物遗传信息表达的规律。从遗传密码表中我们可以看到mRNA中每3个核苷酸组成一个密码子，体现一个氨基酸的信息。 遗传密码的通用性。在64个密码子中，其中61个分别代表各种氨基酸，剩余的3个密码子(UAA、UAG、UGA)为肽链的终止信号,不代表任何氨基酸,这套密码从细菌到人都可通用。;;遗传密码的例外。 1986年报道UGA代表selenocysteine(硒代半胱氨酸) 。2002年报道在Archaea(产甲烷菌的甲胺甲基转移酶中发现 )和真菌中发现UAG可能是编码第22种氨基酸pyrrolysine(吡咯赖氨酸）的密码子。;20世纪60年代末至70年代初，限制性核酸内切酶和连接酶等陆续被发现,有了进行DNA操作基本工具,使DNA进行体外切割和连接成为可能。 1972年美国斯坦福大学Berg博士领导的研究组用EcoRI在体外对猿猴病毒SV40的DNA和λ噬菌体DNA分别酶切,然后用T4 DNA连接酶将两种酶切片段连接，结果获得了SV40和λ噬菌体DNA的重组DNA分子，成功完成了世界上第一次DNA体外重组实验，并因此与Gilbert、Sanger分享1980年度诺贝尔化学奖。;; 二、基因工程的问世 1973年，Cohen等人将编码Kan（卡那霉素 ）抗性基因质粒R6-5和编码Tet(四环素)抗性基因质粒pSC101混合后，加入EcoRI进行酶切，用T4 DNA连接酶连接成重组DNA分子，最后转化大肠杆菌，结果某些转化菌落表现出既抗Kan又抗Tet的双重抗性特性。从这种双抗性转化菌落的大肠杆菌中分离出的重组质粒DNA带有完整pSC101分子和一个来自R6-5质粒编码Kan抗性基因DNA片段。;1973 - Boyer, Cohen Chang:Transform E. coli with recombinant plasmid; 三、基因工程的迅速发展阶段 自基因工程技术问世以来，这三十多年是基因工程迅速发展的阶段。不仅发展了一系列新的基因工程操作技术,而且构建了多种供转化原核生物和动物、植物细胞载体,获??大量转基因菌株。 ;1981年首次通过显微注射培育出世界上第一个转基因动物―转基因小鼠（将大鼠生长素基因转到小鼠）。;1982年，基因工程胰岛素商品在美国投放市场。;1982年，采用农杆菌介导法培育出世界上第一例转基因植物―转基因烟草。;1985年基因工程微生物杀虫剂通过美国环保署审批,1990年基因治疗开始进入临床试验。;; 如果说20世纪八九十年代是基因工程基础研究趋向成熟，应用研究初露锋芒的阶段，那么21世纪初将是基因工程应用研究的鼎盛时期，农、林、牧、渔、医等的很多产品都会打上基因工程的标记。 ;; 一、基础研究 基因工程问世以来，科技工作者始终十分重视基础研究，包括构建一系列克隆载体和相应的表达系统，建立不同物种的基因组文库和cDNA文库，开发新的工具酶，探索新的操作方法等，各方面取得了丰硕的研究成果，使基因工程技术不断趋向成熟。 ;1.基因工程克隆载体的研究 2.基因工程受体系统的研究 3.目的基因研究 医药相关的基因 抗病虫害和恶劣生境的基因 编码具有特殊营养价值的蛋白或多肽的基因;4.基因组研究。1990年开始，先后由美国、英国、日本、德国、法国、中国等国实施“人类基因组计划”，2003年完成全部序列测定，共编码约3-3.5万个基因。至1998年完成基因组测序的生物有11种，如幽门螺旋杆菌(1667867bp，1590个基因)等。 5.基因工程工具酶的研究 6.基因工程新技术研究 ;二、应用研究;1. 基因工程与农业 ;1. 基因工程与农业 ;水稻属C3植物 ;（2）生物固氮的基因工程。若能把禾谷等非豆科植物转变为能同根瘤菌共生，或具固氮能力，将代替无数个氮肥厂。 （3）转基因植物。增加农作物产品的营养价值，如：增加种子、块茎的蛋白质含量，改变植物蛋白的必需氨基酸比例等。提高农作物抗逆性能如：抗病虫害、抗旱、抗涝、抗除草剂等性能。 （4）转基因动物。 （5）产生次生代谢产物。如吲哚乙酸，赤霉素等。;;Ｂｔ棉花是一种具有Ｂｔ杀虫能力的转基因棉花。Ｂｔ是一种土壤杆菌——“苏云金芽孢杆菌”的缩写，这种菌在芽孢的形