實验七 培养细胞的活性测定.pptVIP

实验七 培养细胞的活性测定;实验目的;实验原理; 染料排斥法是利用细胞损伤或死亡时，某些染料如台盼蓝、伊红Y 、苯胺黑等可透变性的细胞膜，与解体的DNA等结合，使其着色，而 活细胞的选择透性能阻止这类染料浸入细胞。; AO/EB双色荧光检测法是利用AO能被活体细胞所吸收，发射出 黄绿色的荧光来；EB只能进入有缺损的膜或固定的死亡细胞，发射 出桔红色的荧光。;实验器材;实验方法; （二）荧光测定法(AO/EB双色荧光分光光度测定法) 将培养细胞制成单细胞悬液，并作适当稀释（106细胞/ml）， 取100微升细胞悬液移入1.5ml离心管中，加入AO/EB染料4微升。 置一滴于载玻片上，上覆盖盖玻片，在荧光显微镜下观察结果。AO 发出的黄绿色荧光，其强度代表活细胞的数量和活性，后者为EB发 出的桔红色荧光，其强度代表死细胞的数量，从AO/EB的比值，可以 直观反映出细胞活性的变化。