實验六 小鼠骨髓细胞染色体标本的制备.pptVIP

实验六 小鼠骨髓细胞染色体标本的制备;一、实验目的;二、实验原理; 首先,为了获得较多的中期分裂相骨髓细胞,必须给动 物注射一定剂量的秋水仙素。秋水仙素对分裂期纺锤丝的 形成具有破坏作用，当动物被注射适量的秋水仙素后,处于 分裂增殖中的骨髓细胞由于纺锤丝不能形成,中期染色体不 能正常趋向两极,因而大量的细胞处于观察染色体形态最佳 的分裂中期。其次,为了能够清楚的观察染色体的形态，取 出的骨髓细胞要经过低渗(KCl溶液)处理使细胞膨胀、染色 体适当的分散。固定(甲醇:冰醋酸)使染色体保持完好的形 态。染色(Giemsa液)使染色体易分辨、观察。 ;1.材料：小白鼠 2.试剂：0.01﹪秋水仙素,0.4%氯化钾 (KCl), Carnoy固定液(甲醇:冰醋酸=3:1),Giemsa染 液，0.01M磷酸缓冲液(pH 6.8)，2%柠檬酸钠。 3.器材：离心机、显微镜、剪刀、解剖刀、小镊 子、注射器及针头、刻度离心管、吸管、载玻 片和盖玻片、染色缸、玻片盒 ;四、实验步骤;; 在显微镜下观察Giemsa染色之后的染色体 片(染色体呈紫红色)，找出分散适度的中期染色 体图象, 观察小白鼠的染色体形态，统计其染色 体数目。 制得好的标本应是细胞多、颜色为紫红色。 此时间期细胞由于低渗和固定处理，细胞膜和质 已被去掉，镜下看到的仅为膨胀后