2.2土壤中分解尿素的细菌的分离及计数课件.pptVIP

课题2土壤中分解尿素的细菌的分离和计数;课题背景:;3、常见的分解尿素的微生物; 1、实例：;（1）分离微生物的依据（1）微生物的特点：包括营养、生理、生长条件等；（2）配置合适的培养基 方法： ①抑制大多数微生物生长 ②造成有利于该菌生长的环境， （2）结果：培养一定时间后，该菌数量上升，再通过稀释涂布平板法等方法对它进行纯化培养分离。;15.0g;;5、怎样证明此培养基具有选择性呢？;1、显微镜直接计数：;如何对细菌进行计数？ ;;如何对细菌进行计数？;2.间接计数法（活菌计数法） （1）常用方法：;注意事项 ①为了保证结果准确，一般选择菌落数在30——300的平板上进行计数。 ②为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上的平皿中，经涂布，培养计算出菌落平均数。（设置重复组的重要性） ③统计的菌落往往比活菌的实际数目低（原因） ④涂布平板法所选择的稀释度很重要，一般以三个稀释度中的第二个稀释度所出现的平均菌落数在50个左右为最好。;1.设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。;;小结：通过这个事例可以看出，实验结果要有说服力，对照的设置是必不可少的。; ㈠.土壤取样 从————的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的——中。 ◆取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要————。 ;◆应在————称取土壤10g。 ◆在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在———进行;为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？;(四).取样涂布(在酒精灯火焰旁）;（五）.微生物的培养观察与计数;微生物的培养与观察;4分析：如果得到了————菌落数目在30——300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数，如果同一稀释倍数的三个重复的菌落数相差较大，表明试验不精确，需要重新实验。 ;三、操作提示 ; 1.通过对照实验，若培养物有杂菌污染，菌落数偏高；若培养物混入其他氮源，则菌落形态多样，菌落数偏高，难以选择出分解尿素的微生物。 2.提示：选择每个平板上长有30—300个菌落的稀释倍计算每克样品的菌数最合适。同一稀释倍数的三个重复的菌落数不能相差悬殊，如相差较大，表示实验不精确。;鉴定：筛选后必鉴定 鉴别培养基：不影响微生物的生存 1、酚红培养基： 鉴定分解尿素的细菌。 原理：脲酶催化尿素分解成氨→培养基碱性增强→ 2、伊红—美蓝培养基： 鉴定大肠杆菌。 原理：代谢产物与伊红—美蓝结合→ 菌落呈————————————。 ;大肠杆菌呈黑色,中心有金属光泽;本课题知识小结:; 1.使用选择培养基的目的是（ 　） A.培养细菌　　 B.培养真菌　　 C.使需要的微生物大量繁殖 D.表现某微生物的特定性状与其他微生物加以区别 2.能合成脲酶的微生物所需要的碳源和氮源分别是( ) A.CO2和N2 B.葡萄糖和NH3　　 C.CO2和尿素 D.葡萄糖和尿素;3.下列说法不正确的是（ 　） A.科学家从70－80度热泉中分离到耐高温的TaqDNA聚合酶 B.统计某一稀释度的5个平板的菌落数依次为M1、M2、M3、M4、M5，以M3作为该样品菌落数的估计值 C.设置对照实验的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度 D.同其他生物环境相比，土壤中的微生物数量最大，种类最多。 4.为培养和分离出酵母菌并淘汰杂菌，常在培养基中加入（　　） A.较多的氮源物质 B.较多的碳源物质 C.青霉素类药物 D.高浓度食盐;