第2军医大学免疫教程二-基因工程Ig.pptVIP

免疫球蛋白基因 和基因工程抗体 Immunoglobulin Genes and Genetically Engineered Antibodies;免疫球蛋白基因 Immunoglobulin Genes;免疫球蛋白 (Immunoglobulin, Ig) 抗体 (antibody) 分泌型Ig (secreted Ig, SIg) 膜型Ig (membrane Ig, mIg);人工制备的抗体 多克隆抗体 (polyclonal antibody) 单克隆抗体 (monoclonal antibody) 基因工程抗体 (genetic engineering antibody); (一)基本结构：Ig单体由两条重链和两条轻链经二硫键连接而成。 ;(m链); Ig的可变区和恒定区 重链可变区 (variable region of heavy chain, VH) 轻链可变区 (variable region of light chain, VL); 重链恒定区 (constant region of heavy chain , CH) 功能区: CH1~3(IgG、IgA、IgD) CH1~4(IgM、IgE) 轻链恒定区 (constant region of light chain, CL);VH;高变区 (hypervariable region, HVR)又称 互补决定区 (complementarity-determining region, CDR) VH和VL各有3个CDR(CDR1~3), 共同组成 Ig的抗原结合部位。 骨架区(framework region, FR) VH和VL各有4个FR(FR1~4);免疫球蛋白CDR和FR结构示意图 ;(二)Ig的水解片段;;(三) 功能区或结构域(domain) 免疫球蛋白超家族 (immunoglobulin superfamily, IgSF); 胚系Ig基因在基因组中以基因簇(gene clusters)的形式存在。 重链基因簇(IGH)：含V, D, J, C基因片段 IGHV, IGHD, IGHJ, IGHC k轻链基因簇(IGK)：含V,J,C基因片段 IGKV, IGKJ, IGKC ?轻链基因簇(IGL)：含V,J,C基因片段 IGLV, IGLJ, IGLC; 人Ig基因片段 基因片段 Ig基因 V D J C IGH 95(50) 23 9(6) 11(9) IGK 90(60) 0 5 1 IGL 60(30) 0 7 7(4);;重排序列信号（RSS） rearrangement singnal sequance;Ig基因重排和表达;转换区 switch region;基因工程抗体(genetic engineering antibody) ;;一、鼠单抗人源化 ; 用人抗体的恒定区取代鼠单抗的恒定区，使鼠 单抗恒定区人源化，但保留鼠单抗的可变区。;Fab和F(ab’)2嵌合抗体： 将鼠的功能性抗体轻链和重链可变区 基因分别与人抗体的?链和重链CH1恒定 区基因重组，克隆到表达载体中。 主要通过哺乳类细胞表达，最常用的 是小鼠骨髓瘤细胞系和CHO细胞 。; 最大限度地减少鼠单抗的异源性，又能使人单 抗获得鼠单抗的特异性。 ;二、单价小分子抗体; 由重链Fd段和完整的轻链通过一个链间二硫 键连接形成的异二聚体，只有一个抗原结合部位。 ;(二)Fv和ScFv(single-chain Fv) ;ScFv： VH-linker-VL或VL-linker-VH Linker一般含有14～15个氨基酸残基，应用最广的是含有重复出现的4个甘氨酸和一个丝氨酸的(Gly4Ser)3 优点： ①比Fv稳定； ②保持单价结合抗原的亲和力； ③分子量小，组织穿透性较强。;(三