射线粉末衍射法测定药物的多晶型.docVIP

?一、实验目的 1. 熟悉χ-射线粉末衍射法确定药物多晶型的基本原理与方法 2. 掌握 x-射线粉末衍射图谱的分析与处理方法 二、基本原理 χ-射线衍射是研究药物多晶型的主要手段之一，它有单晶法和粉末χ-射 线衍射法两种。可用于区别晶态与非晶态、混合物与化合物。可通过给出晶胞 参数，如原子间距离、环平面距离、双面夹角等确定药物晶型与结构。 粉末法研究的对象不是单晶体， 而是许多取向随机的小晶体的总和。 此法 准确度高，分辨能力强。每一种晶体的粉末图谱，几乎同人的指纹一样，其衍 射线的分布位置和强度有着特征性规律， 因而成为物相鉴定的基础。 它在药物 多晶的定性与定量方面都起着决定性作用。 当χ-射线（电磁波）射入晶体后，在晶体内产生周期性变化的电磁场， 迫使晶体内原子中的电子和原子核跟着发生周期振动。 原子核的这种振动比电 子要弱得多，所以可忽略不记。振动的电子就成为一个新的发射电磁波波源， 以球面波方式往各个方向散发出频率相同的电磁波，入射χ-射线虽按一定方 向射入晶体，但和晶体内电子发生作用后，就由电子向各个方向发射射线。 当波长为λ的χ-射线射到这族平面点阵时，每一个平面阵都对χ-射线产 生散射，如图 5-1。 先考虑任一平面点阵 1 对χ-射线的散射作用：χ-射线射到同一点阵平面 的点阵点上，如果入射的χ-射线与点阵平面的交角为θ，而散射线在相当于 平面镜反射方向上的交角也是θ， 则射到相邻两个点阵点上的入射线和散射线 所经过的光程相等，即 PP=QQ=RR。根据光的干涉原理，它互相加强，并且 入射线、散射线和点阵平面的法线在同一平面上。 再考虑整个平面点阵族对χ-射线的作用：相邻两个平面点阵间的间距为 d，射到面 1 和面 2 上的χ-射线的光程差为 CB+BD，而 CB=BD=dsinθ，即相邻两个点阵平面上光程差为 2dsinθ。根据衍射条件，光程差必须是波长λ 的整数倍才能产生衍射，这样就得到χ-射线衍射（或 Bragg 衍射）基本公式： 2dsinθ =nλ （5-1） θ为衍射角或 Bragg 角，随 n 不同而异，n 是 1，2，3……等整数。 以粉 末为样品，以测得的χ-射线的衍射强度( I ) 与最强衍射峰的强度（I0）的 比值（I/I0）为纵坐标，以 2θ为横坐标所表示的图谱为粉末χ-射线衍射图。 通常从衍射峰位置（2θ） ，晶面间距（d）及衍射峰强度比（I/I0）可得到样 品的晶型变化、结晶度、晶体状态及有无混晶等信息。χ-射线粉末计数管衍 射仪如图 5-2。 χ-射线衍射仪法是将样品装在测角圆台 P 中心架上，圆台的圆周边装有 χ-射线计数管 C，以接受来自样品的衍射线，并将衍射转变成电信号后，再 经放大器放大，输入记录器记录。 用衍射仪法测定样品衍射数据时，需注意样品粉末的细度（约为微米） ， 研磨过筛时特别要注意观察试样是否有变化。 例：尼莫地平（nimodipine，NMD）的两种多晶型分别为 NMDⅠ与 NMD Ⅱ，其粉末χ-射线衍射测定如下：工作条件：Cu-Kα靶，λ=0.154nm 石墨单 色器衍射束单色比，高压 50KV，管流 1000A，放大倍数 6，扫描速度 2°/min, NMDⅠ、NMDⅡ的衍射结果、相对强度见图 5-3、表 5-1。 可见，χ-射线衍射线分布位置和强度有着特征性的规律，选择各晶型 8 个强峰进行比较，如表 5-1。? ?三、样品制备与测试条件 样品制备 取一定量的样品，在玛瑙乳钵中研磨一定时间。 甲苯咪唑Ⅰ型（B）研磨 5 分钟 甲苯咪唑Ⅱ型（C）研磨 10 分钟（药用型） 甲苯咪唑Ⅲ型（A）研磨 15 分钟 测试条件 χ射 线 管: Cu -Kα靶 Ni 滤波单色标识 χ射线波长: 1.54051? 管压: 30KV 管电流: 16mA 扫 描 角度: 3° ～ 50° 扫描速度: 4°/min 测试 样品用晶体粉末，如图 5-4 所示。 四、数据处理 甲苯咪唑（A、B、C 晶型）x 射线粉末衍射图谱见附图。 1、首先确定衍射图谱中八条谱线，并依强弱顺序编号为 1～8，然后再用 格尺分别量出它们的高度（即为衍射强度） 。 2、以各图谱中 1 号衍射峰高度为 I0 ，然后分别求出其它衍射峰高度与 1 号衍射峰的比值，即 Ii/I0（i=2～8） 。 3、由衍射峰顶所对应的 2θ求出 sinθ，然后由 Bragg 方程求出 d/n。 4、将上述所得数据列表 5-2，并根据测得结果确定甲苯咪唑是否为多晶 型。 参考文献 1 逄秀娟. 沈阳药科大学学报, 1997, 14(1):11 2 张修元. 山东医药工业, 2001, 20(2):29 3 董成. 理学 x 射线衍射技术协会论文选集, 1999, 2(2):172