4-培养基的灭菌学案.ppt

发酵工业需纯种培养，若在培养过程中污染杂菌，则会导致： ①基质或产物因杂菌的消耗而损失，造成生产能力的下降； ②产物的提取或分离困难，造成收率降低或使产品的质量下降； ③改变反应介质的pH，使生物反应发生变化； ④分解产物，使生产过程失败； ⑤发生噬菌体污染，使生产过程失败。 ;为了保证培养过程的正常进行，防止染菌的发生，对大部分微生物的培养，包括实验室操作和工业生产，均需严格的灭菌。 液体培养基的灭菌的方法有： ⑴利用热能； ⑵利用化学药物； ⑶利用机械方法，例如过滤、离心分离、静电等方法； ⑷采用x—射线、β—射线、紫外线、超声波、微波、电磁波等对物料进行灭菌。; 我国目前大都采用蒸汽加热灭菌。也称为湿热灭菌法。 其优点是： ⑴可采用高温短时间，培养基的营养成分的破坏较少， ⑵便于自动化，提高生产??。;（一）培养基热灭菌的动力学 ;1．对数残留公式与理论灭菌时间;取边界条件t0=0，N=N0，对（1）积分得;2．十进衰减时间与反应速度常数k;3、温度对k的影响;⑴从以上方程可以看出： ①活化能E的大小对k值有重大影响。其它条件相同时，E越高，k越低，热死速率越慢。 ②不同菌的孢子的热死灭反应E各不相同。 ③反应的E越高，lnk 对T 的变化率越大，即T的变化对k的影响越大。 ⑵试验表明，细菌孢子热死灭反应的E很高，而某些有效（营养）成分热破坏反应的E较低。 培养基灭菌时将温度提高到一定程度，会加速细菌孢子的死灭速度，稍微增大对有效成分的破坏速度。但由于灭菌时间的显著缩短，有效成分的破坏反而减少。;（二）培养基分批灭菌;;间歇灭菌的操作（如图）： 发酵罐的空气分过滤器灭菌并用空气吹干。 进料完毕，开搅拌以防料液沉淀。 开夹套蒸气阀，使料液预热升温至80℃，关闭夹套蒸气阀门。 开空气、出料、取样阀门，进蒸气，开排汽阀，包括小辫子（进料管、补料管、接种管和排汽管）。当升温至110℃左右，控制进出汽阀门直至温度121 ℃，保温30min。 保温结束后，关过滤器排气阀、排汽阀、进汽阀；关夹套下水道阀；开冷却水进回水阀。 待罐压??于过滤器压力时，开空气进气阀通入无菌空气，通入冷却水，将培养基温度降至培养温度。;（三）培养基连续灭菌;连消塔加热的连续灭菌流程;2、喷射加热的连续灭菌流程 料液高速喷出，将蒸汽吸入与之混合。 培养基在指定的灭菌温度下逗留的时间由维持段管子的长度来保证。;3、薄板换热器连续灭菌流程 培养液在设备中同时完成预热、加热灭菌、维持及冷却的过程。 由于待灭菌培养液的预热过程同时作为灭菌培养液的冷却过程，因而节约了能耗。;※板式换热器 薄板冲压成特殊形状，板与板之间的间隙很窄。流体在狭窄弯曲的通道中流动时，经过多次方向和流速的改变，使流程破坏，产生湍流，强化传热过程，提高传热系数。 ;根据流体通过板间的流动方式，分为条流板和网流板 ;根据流体流动路线，分为直线流型和对角流型两种 ;思考题