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甘草酸与甘草多糖的提取与测定 摘要：甘草酸的提取是甘草开发和甘草应用的关键技术之一。综述了甘草中有效成分甘草酸、甘草多糖的提取和测定方法的研究概况。稀醇溶液对甘草酸的提取效果较好，添加稀氨水后可以提高甘草酸的提取收率，超声辅助提取可以提高并节约提取溶剂和提取时间。因此，本次试验以甘草粉末为原料,乙醇与稀氨水作溶剂,用超声波辅助提取法提取甘草酸。 关键词：甘草酸 甘草多糖 超声提取 测定 1、前言 甘草是蝶形花科（Fabaceae）、甘草属(Glycyrrhiza)植物，我国药典记载药用甘草有乌拉尔甘草、胀果甘草、光果甘草。甘草地下部分是名贵中药材，地上部分是多年生牧草。甘草具有抗寒、耐热、耐旱、抗盐碱等优良特性，适生性和抗逆性强，生命力旺盛，为干旱、半干旱地区重要的植物资源之一。早在2000多年前，《神农本草经》就将其列为药之上乘，医药家陶弘景将甘草尊为“国老”。甘草味甘、性平，有补脾益气、止咳祛痰、清热解毒的功能，用于脾胃虚弱、中气不足、咳嗽气喘、解毒等病症。现代研究表明，甘草还有肾上腺皮质激素样的作用，可治慢性肾上腺皮质机能低下症和胃、十二指肠溃疡，以甘草配伍的古方有“四君子汤”、“甘草甘姜汤”、“凉隔丸”、“复脉丸”、“甘草大枣汤”等，近年来又发现甘草可抗癌和防治艾滋病，又是预防和治疗SARS的复方组份之一。 甘草的主要有效成分为甘草酸(glycyrrhizic acid)及甘草次酸(glycyrrhetinic acid)等三萜类化合物、甘草黄酮类化合物以及甘草多糖等。药理研究表明，甘草酸及甘草次酸具有解毒、消炎、镇痛、抗肿瘤的作用。近年来，还用于防治病毒性肝炎、癌症以及艾滋病等。甘草酸作为其主要有效成分, 随产地不同含量亦不同,一般在(4～14)%之内，它属于三萜皂苷，甘草根及根茎含甘草甜素，为甘草酸的钾、钙盐。甘草酸作为甘草的主要成分，质量分数一般在4%--14%之间。甘草酸一般为白色或淡黄色的结晶型粉末。熔点220，有特殊甜味，溶于热水或者热的稀乙醇，不溶于无水乙醇和乙醚。 2、实验部分 2.1 实验材料 2.1.1 实验药品与试剂 0.5%氨水、10%乙醇、50%乙醇，70%乙醇、95%乙醇、2%氢氧化钠，5%盐酸，3.5mol /L硫酸、50%稀醇、葡萄糖标准品 、70%硫酸、氨醇（氨—乙醇—水（0.5：10：89.5））。 2.1.2 实验器材 实验室台式超声、FW177型中草药粉碎机、旋转蒸发仪、电子天平、HH-Z型数显恒温水浴锅、电热恒温干燥箱、循环水式真空泵、722S可见光分光光度计、80目尼龙筛。 烧杯、玻璃棒、容量瓶（10ml、50ml、100ml）、吸量管、胶头滴管、试管 2.1.3 原料 经过前期加工的甘草粉末 2.2 实验过程 2.2.1 粉碎 选用优质市售甘草，采用中草药粉碎机将其粉碎成粉末。 2.2.2 超声提取甘草酸 用电子分析天平准确称取30．00 g、过80目尼龙筛的甘草粉末于锥形瓶中,加入的提取液，即氨性醇溶剂（氨水浓度(V/V)为0.5%,乙醇浓度(V/V)为(50%)）,料液比为1:20，超声30min，再将其残渣用相同方法进行第2次提取，此时溶剂和时间变为原来的2/3，即加入140ml的氨醇，超声30min。分开收集上清液和沉淀渣籽并记录两次收集的滤液体积。将两次的收集提取液放于试剂瓶中，静置24小时，用于测定甘草酸的浓度计提取率。 2.2.3 测定 将收集的提取液置于旋转蒸发仪中，60℃减压浓缩，浓缩体积为68ml。提取液摇匀，准确移取0.1ml的提取液转移到25ml容量瓶中，用70%乙醇定容，静置20min后，于254nm处测定吸光度。 2.2.4 标准曲线的制作 精密称取甘草酸标准品10.00mg，置于10mL容量瓶中，加70%乙醇溶解定容。精密吸取0.50mL，0.75mL， 1.00mL，1.25mL，1.50mL，分别置于25mL容量瓶中，加70%乙醇摇匀，定容，静置20min，在波长254nm处测定吸光值。以浓度x(mg/mL)为横坐标，吸光度y为纵坐标绘制标准曲线，计算出回归方程。 2.2.4.1 标准曲线 编号012345吸光度00.27310.38990.49360.58650.7336浓度mg/ml00.020.030.040.050.06 2.2.5 实验结果 样品甘草酸的吸光度： 序号一二三四平均吸光度 0.625 0.630 0.630 0.633 0.6295根据回归方程：y=11.866x+0.0172 可得：x=0.0516 样品甘草酸的浓度为：0.0516mg/ml 2.2.6 甘草多糖的提取 称取50g甘草残渣，置