生物组织中还原糖实验课教案.docVIP

生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 一、实验原理 （1）鉴定实验设计的理念： 某些化学试剂 + 生物组织中有关有机化合 产生特定的颜色反应。 （2）具体原理： ①可溶性还原糖+ 斐林试剂→砖红色沉淀。 ②脂肪小颗粒 + 苏丹Ⅲ染液→橘黄色小颗粒。 ③蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色反应。 二、目标要求 初步掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。 三、重点、难点 1.重点 ①初步掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。 ②通过实验的操作和设计培养学生的动手能力，掌握探索实验设计技巧，从而培养创新思维能力。 2.难点 根据此实验方法、原理，设计实验来鉴定常见食物的成分。 四、实验材料 1.可溶性还原糖的鉴定实验：选择含糖量较高、颜色为白色或近白色的植物组织，以苹果、梨为最好。 2.脂肪的鉴定实验:选择富含脂肪的种子，以花生种子为最好（实验前浸泡3h～4h）。 3.蛋白质的鉴定实验:可用浸泡1d～2d的黄豆种子（或用豆浆、或用鸡蛋蛋白）。 五、仪器、试剂 1.仪器：剪刀，解剖刀，双面刀片，试管，试管架，试管夹，大小烧杯，小量筒，滴管，玻璃漏斗，水浴锅，研钵，石英砂，纱布，载玻片，盖玻片，毛笔，吸水纸，显微镜。 2.试剂:①斐林试剂（0.1g/L的NaOH溶液+ 0.05g/mL的CuSO4溶液）；②苏丹Ⅲ染液；③双缩脲试剂；④ 体积分数为50%的酒精溶液；⑤蒸馏水。 六、方法步骤 1.制备试剂。 2.可溶性还原糖的鉴定、方法、步骤。 3.脂肪的鉴定、方法、步骤。 4.蛋白质的鉴定、方法、步骤。 七、教学过程 新课引入：我们在化学中学习过物质的鉴定，其原理是被鉴定的物质与所用的化学试剂要么发生颜色反应，要么产生沉淀，我们生物学上也采用此原理，在生物学中物质鉴定的理念是：某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。 新课教学：（具体原理） ①可溶性还原糖+ 斐林试剂→砖红色沉淀。（水浴加热） ②脂肪小颗粒 + 苏丹Ⅲ染液→橘黄色小颗粒。（要显微镜观察） ③蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色反应。（要先加A液NaOH 溶液再加B液CuSO4 溶液） 今天，我们学习鉴定生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。 （一）还原糖的鉴定 1、还原糖的鉴定步骤: 选材选新鲜的苹果适量制备组织 样液苹果：洗净、去皮、切块，取5g放如研钵中研磨成浆：加石英砂，加5 ml水研磨过滤：将玻璃漏斗插入试管中，漏斗上垫一层纱布注入组织 样液2ml取一支试管，向试管内注入2ml苹果组织样液加斐林试剂2ml由斐林试剂甲液和乙液充分混合而成，不能分别加入水浴加热煮沸2min观察溶液 颜色变化浅蓝色→棕色→砖红色。2、实验成功的要点： ①还原糖的鉴定实验:选择含糖量较高、颜色为白色或近白色的植物组织，以苹果、梨为最好。 ②斐林试剂要两液混合均匀且现配现用。 斐林试剂的配制过程示意： 斐林试剂甲液（ 0.1 g/ml的 NaOH 溶液）按一定比例混合均匀 斐林试剂斐林试剂乙液（ 0.05 g/ml的 CuSO4 溶液）切不要将甲液和乙液分别加入组织样液中。实际上这个反应利用的是斐林试剂中的氢氧化铜作为弱氧化剂参与还原糖的反应，而氢氧化铜放置过久沉淀过多则不利于反应。 ③在水浴加热时，试管底部不要触及烧杯底，以防止试管受热不均匀而爆裂；并注意试管口也不要朝向自己或他人，防止沸腾的溶液冲出试管造成烫伤。另外，加入的斐林试剂不要太多，反而会使实验效果不理想。 ④在鉴定尿液中是否含有葡萄糖时还能用其他那些鉴定方法？ 学生回答：还可以用斑氏试剂产生砖红色沉淀；及糖尿试纸据糖的由少到多产生浅蓝、浅绿、棕或深棕色。 （二）脂肪的鉴定 1、脂肪的鉴定步骤: 选材花生种子（浸泡3-4h），将子叶削成薄片，取理想薄片制片在薄片上滴2-3滴苏丹Ⅲ染液去浮色制成临时装片观察先在低倍镜下，找到材料的脂肪滴，然后，转为高倍镜观察。结论细胞中的圆形脂肪小颗粒已经被染成橘黄色。2、实验成功的要点： ①.脂肪的鉴定实验:选择富含脂肪的种子，以花生种子为最好(实验前浸泡3h～4h)。 ②该试验成功的关键是获得只含有单层细胞理想薄片，如果太厚光线不能通过。 ③滴苏丹Ⅲ染液染液染色2-3min，时间不宜过长，以防细胞的其他部分被染色。 （三）蛋白质的鉴定 蛋白质的鉴定步骤： 制备组织样液黄豆组织样液（或鸡蛋白稀液） 【黄豆浸泡?→去皮→切片→研磨→过滤→滤液】?显色 反应取组织样液2ml加入试管加入双缩尿试剂A?[0.1g/mLNaOH]?2ml?【创设碱性条件】摇荡均匀再加入双缩尿试剂B【0.1g/mLCuSO4】