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- 2017-04-21 发布于湖北
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实验四 小鼠的超数排卵及胚胎收集 ;一、实验目的:利用外源生殖激素进行超数排卵处理,收集胚胎及胚胎形态学的观察。掌握超数排卵的各个技术环节,了解胚胎的发育及质量评估。 ;二、实验材料
1.动物 4-6周龄供体昆白系雌性小鼠,成年雄 性小鼠与之1:1—1:3配比(亦可利用 其它实验动物)
2.药品 PMSG、hCG、FSH、LH;生理盐水、 75%酒精。
3.器械 一次性注射器(10 ml、5ml、1 ml)、 手术刀、剪刀、镊子、表面皿、培养 皿、显微镜。
;三、鼠的超数排卵和胚胎收集?;四、实验步骤
1、超数排卵
取4-6周龄性成熟雌性小鼠,第1天注射
30 IU PMSG, 第3天注射30 IU hCG,注射后与性成熟的公鼠同笼,次日早晨检查阴道栓(第4天),有栓的小鼠分开饲养。;2、胚胎的收集
注射hCG后72-84 h(第6天)处??小鼠(颈椎脱臼法),将处死并固定好的小鼠,沿腹中线剪开腹腔,向前方揭去肠胃内脏,即可在肾脏后方看到两侧呈的卵巢、输卵管和子宫,找到输卵管壶腹部,剪下,置于表面皿或培养皿中,用细针将其划破,能看见一团物质流出,此就是受精的胚胎。;1;;3 胚胎鉴定 将培养皿
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