第十二章核酸的生物合成—1.ppt

;中心法则;12.1 DNA的半保留复制;母链;12.2 DNA复制的过程;DNA复制的方向;DNA复制所需要的原料？;n1dATP;引物;DNA聚合酶I： 催化DNA链的延长； 外切酶（从3‘或5’端把DNA链水解） DNA聚合酶II： 催化DNA聚合反应； 外切酶活性（无5‘－3’外切酶活力）； 活性低 DNA聚合酶III： DNA链的聚合； 活性最强。;DNA聚合酶 （E.coli大肠杆菌）;DNA聚合酶（yeast酵母菌）;＊ 模板 ＊ dNTP ＊ 引物 (3’-OH) ＊ DNA链合成的方向 (5’-3’) ＊ 合成的两条子链是互补的;12.3 双链DNA复制的分子机制;5‘;几个重要的概念;引物;DNA连接酶;后随链的合成过程：;参与大肠杆菌染色体DNA复制的主要蛋白质;12.4 真核细胞DNA的复制;12.5 DNA的损伤与修复; 错配 核苷酸的删除或加入 DNA重组;错配修复 光复活修复 切除修复;错配修复;光复活修复;光复活酶 （可见光） ;切除修复（暗修复）;限制性内切酶; 高专一性 (DNA) 特异的结合位点 (4~8 bp);;质粒——比较小的双链环形DNA。只占细胞DNA的一小部分，但常含有某些抗性基因。 纯化的质粒常用作克隆载体。;Polymerase chain reaction (PCR) 体外模拟自然DNA复制过程的核酸扩增技术，即无细胞分子克隆技术。 以待扩增的两条DNA链为模板，由一对仍合成的寡聚核苷酸引物介导，通过DNA聚合酶酶促反应，快速体外扩增特异的DNA序列。（扩增数百万倍） 操作简单，快速，特异，灵敏