【优化方案】(浙江专用)高考生物二轮复习 专题八 现代生物科技专题 第1讲 基因工程和克隆技术课件.ppt

第1讲　基因工程和克隆技术;2016高考导航;专题八　现代生物科技专题;1．基因工程的工具 (1)限制性核酸内切酶 ①来源：主要从原核生物中分离纯化出来。 ②作用 a．__________________________________________________ b．________________________________ ③结果：产生____________。 ;(2)DNA连接酶 作用：将具有________________的两个DNA片段连接在一起。 (3)质粒 ①从存在位置看——在细菌中独立于拟核之外。 ②从化学成分上看——为双链环状DNA分子。 ③从功能上看——能自主复制。 ④从结构上看——常含有抗生素抗性基因。 ;方法;方法;(3)将目的基因导入受体细胞;(4)筛选含有目的基因的受体细胞和目的基因的表达 ①筛选：用含__________的培养基培养受体细胞，选择含____________的受体细胞。 ②表达：目的基因在宿主细胞内表达产生人们需要的____________。;3．几种重要的克隆技术分析 (1)植物细胞培养、器官培养和原生质体培养的关系;机械消化或胰蛋白酶消化;单个细胞;仙台病毒或聚乙二醇;(5)动物的克隆繁殖 ;命题点1　基因工程及转基因技术的安全性;目的基因的获取;细胞质;1．目的基因应插入启动子与终止子之间的部位。 2．将目的基因导入受体细胞没有碱基互补配对现象。 3．原核生物作为受体细胞的优点：繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等。 4．一般情况下，用同一种限制酶切割质粒和含有目的基因的片段，但有时可用两种限制酶分别切割质粒和目的基因，以避免质粒和质粒之间、目的基因和目的基因之间的连接。 ;5．标记基因的作用——筛选、检测目的基因是否导入受体细胞。 6．受体细胞常用植物受精卵或体细胞(经组织培养)、动物受精卵(一般不用体细胞)、微生物(大肠杆菌、酵母菌)等。 7．启动子(DNA片段)≠起始密码子(RNA)；终止子(DNA片段)≠终止密码子(RNA)。;限制酶;显微注射;逆转录;③经研究发现，如果将该凝乳酶的第20位和24位氨基酸变为半胱氨酸，则其催化能力将提高2倍。现已知通过蛋白质工程可生产高效凝乳酶，请写出有关制备步骤： _____________________________________________________ __________________________________________________。;命题点2　克隆技术;细胞壁;杂交瘤;1．答题时不能混用的两种细胞——重组细胞和杂交细胞 (1)重组细胞：体细胞的细胞核移植到去核卵母细胞之后形成的细胞叫重组细胞。 (2)杂交细胞：动物细胞融合形成的细胞常称为杂交细胞。 2．明确单克隆抗体制备过程中的两次筛选 第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞(A为效应B细胞，B为骨髓瘤细胞)，不需要A、B、AA、BB型细胞。第二次筛选：利用多孔板法和抗原—抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。;植物组织培养;①⑦⑧;灰;内细胞团;骨髓瘤细胞;(2)①过程类似于植物组织培养技术中的____________过程。与纤维母细胞相比，诱导干细胞的全能性较_________________________________________________。 ②过程的实质是_______________________________________________。 (3)生产单克隆抗体一般不直接培养效应B细胞，主要原因是__________________________________________________。;(4)④处需要筛选，从而得到_____________________________________________________ 细胞，且培养该细胞的气体环境为_________________________________________________。